Approccio diagnostico al Covid - Dott. Alessandro Conte Medico di Direzione - OMCEO Udine
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Approccio diagnostico al Covid
Dott. Alessandro Conte
Medico di Direzione
▪ Premessa
▪ Caratteristiche Sars-Cov2
Programma ▪ Perché non un prelievo?
▪ Quali le possibilità di fare diagnosi?
▪ Prospettive future
16 Marzo 2020
“non si può fermare la pandemia da
Covid-19 se non si sa chi viene
contagiato e chi no”
Tedros Adhanom Ghebreyesus
▪ Testing objectives A and B - Control
transmission and monitor incidence and trends,
and assess severity over time
▪ Testing objective C - Mitigate the impact of
Testing COVID-19 in healthcare and social care settings
objectives ▪ Testing objective D - Identify outbreaks in
specific settings
▪ Testing objective E - Prevent (re-)introduction
into regions/countries with sustained control of
the virus
Il Sars-Cov2 • è un virus ad acido ribonucleico a filamento singolo
(RNA) a senso positivo di grandi dimensioni
• Diverse proteine strutturali, ovvero proteina
nucleocapsidica (NP) che contiene l'RNA virale,
proteina spike (SP), proteina dell'involucro (EP) e
proteina della membrana (MP), che creano l'involucro
virale.
• diametro di 50- 200 nm e possiede punte sulla sua
superficie, fino a 20 nm di lunghezza, che gli
conferiscono la forma di una corona, una
caratteristica dei coronavirus (CoV).
▪ x
Recettori ACE2
▪RT PCR
I test disponibili ▪Antigenico
▪SierologicoIl tampone rinofaringeo
Il tampone rinofaringeo
▪ Solo le cellule nasali che posseggono un particolare recettore di
superficie (ACE-2)e che sono concentrate in prevalenza nella mucosa
olfattoria e sulle pareti del cavo rinofarigeo vengono aggredite ed
infettate dal virus. Questa regione anatomica è pertanto quella dove è
più facile e più comodo raccogliere campioni virali.
▪ L’errore tecnico più comune deriva dalla errata percezione
anatomica prodotta dalla forma esterna del naso che induce ad
indirizzare il tampone verso la parte alta delle fosse nasali. Così ci si
avvicina all’area molto sensibile del turbinato medio, la manovra
Il tampone produce forte dolore e salvo il caso di pazienti con carica virale molto
elevata aumenta la probabilità di ottenere campioni sterili.
rinofaringeo ▪ La distanza dalle narici è variabile ma nell’adulto è valutabile intorno ai
9-10 centimetri. La quasi totalità del tampone per il prelievo deve
sparire nell’interno del naso finchè non sia percepibile la resistenza
della parete posteriore del nasofaringe.
▪ Raggiunta la sede corretta per il prelievo, il tampone deve essere fatto
ruotare delicatamente per molti secondi così da raccogliere un
campione il più possibile attendibile. L’estrazione deve avvenire
lentamente nella stessa direzione di ingresso, sempre ruotando il
bastoncino.▪ RT-PCR = “Reverse-transcriptase polymerase chain
reaction”
▪ Metodica utilizzata per rilevare frammenti di acidi
nucleici, replicarli (amplificazione) e renderli rilevabili.
RT-PCRAperto Mix and Match
Tipologie di sistemi
Chiuso
Extraction
Extraction and Amplification AmplificationEd il risultato?
▪ Si definisce sensibilità di un esame diagnostico la
capacità di identificare correttamente i soggetti
ammalati, ovvero affetti dalla malattia o dalla
Ripassino... condizione che ci si propone di individuare. Se un test
ha un'ottima sensibilità, allora è basso il rischio di falsi
negativi, cioè di soggetti che pur presentando valori
SENSIBILITÀ normali sono comunque affetti dalla patologia o dalla
condizione che si sta ricercando.
e
SPECIFICITÀ ▪ Si definisce specificità di un esame diagnostico la
capacità di identificare correttamente i soggetti sani,
ovvero non affetti dalla malattia o dalla condizione che
ci si propone di individuare. Se un test ha un'ottima
specificità, allora è basso il rischio di falsi positivi,
cioè di soggetti che pur presentando valori anomali
non sono affetti dalla patologia che si sta ricercando.RT PCR
E LA SENSIBILITÀ CLINICA?67,5%
▪ Costi maggiori
▪ Tempi di processazione
▪ Necessità di reagenti ed
Contro… apparecchiature
▪ Necessità di personale
adeguatamente formatoIl test antigenico
Il test rapido antigenico ricerca alcune componenti
proteiche del virus (definite “antigeni”) nei campioni
prelevati mediante tampone e non il genoma viraleCome funziona
Il test antigenico
RT PCR vs RAD
RT PCR vs RAD
Test sierologici
Test sierologici
▪ Non sostituiscono in alcun modo gli strumenti di testing
sin qui descritti per fare diagnosi
▪ Cross reazioni !
▪ Hanno valenza per studi di prevalenza e programmi di
salute publblica
▪ Non sono generalmente considerati uno strumento per
la valutazione della risposta al vaccino
Test sierologici: ▪ Alcuni pattern richiedono conferma immediata con
aspetti chiave test di ricerca viraleUna guida alla scelta
Test salivari ▪ Sia molecolari che antigenici
▪ Diverse modalità di raccolta, tutte meno
invasive del tampone nasofaringeo
▪ Saliva come campione biologico mal si
presta, per densità ampiamente variabile,
ai processi automatizzati
▪ Sensibilità compresa tra 53/73%Test salivare per i sintomatici
▪ La saliva può essere utilizzata per i sintomatici come
alternativa ai tamponi oro/nasofaringei per
Test salivari l’identificazione di infezione da SARS-CoV-2
preferibilmente entro i primi 5 giorni dall’inizio dei
sintomi.
Test salivare per gli asintomatici
▪ Il campione di saliva può essere considerato un’opzione
per il rilevamento dell’infezione da SARS- CoV-2 in
individui asintomatici sottoposti a screening ripetuti per
motivi professionali o di altro tipo, per aumentare
l’accettabilità di test ripetuti, in particolare:
▪ se vengono sottoposti a screening individui molto
anziani o disabili
▪ in caso di carenza di tamponi
▪ testing nei bambini.Ruolo imaging
GREEN PASS
▪ Test RT PCR -> 72 h
▪ Test Antingenico -> 48h
▪ Test salivare : SOLO molecolare,
Antigenico NON ammesso▪ L’algoritmo è in grado di riconoscere, in un
gruppo di pazienti con sintomi simili-
influenzali, le persone con infezione da SARS-
CoV-2 a partire dai risultati degli esami del
Prospettive sangue, anche quelli ordinari, ovvero il classico
emocromo.
▪ Questo tipo di approccio, più rapido e a basso
costo del tampone, seppure con un’accuratezza
inferiore, potrebbe aiutare la gestione
dell’emergenza nei pronto soccorso,Prospettive
▪ i test sierologici non possono essere utilizzati per la
diagnosi di infezione in atto: a tal fine occorre utilizzare i
metodi diagnostici che rilevano la presenza diretta del
genoma del virus o delle sue proteine (antigeni);
▪ I test antigenici rapidi su tampone naso-faringeo possono
essere utili in determinati contesti, come il tracciamento
dei contatti di casi positivi o lo screening rapido di
numerose persone;
In conclusione ▪ I test antigenici e molecolari su campioni di saliva al
momento difficilmente si prestano allo screening rapido
di numerose persone in quanto richiedono un laboratorio
attrezzato;
▪ Il test molecolare rimane a tutt’oggi il gold standard per la
diagnosi; gli altri metodi vanno utilizzati se non si dispone
della possibilità di accedere al test molecolare classico,
oppure per scopi diversi dal contesto diagnostico, quale la
sorveglianza epidemiologica. I▪ Il test perfetto non esiste
▪ Sostenibilità e rapidità guidano la scelta
in contesti di diversa prevalenza
Take Home
Message ▪ LA CLINICA è SEMPRE REGINA. Il
paziente altamente sospetto va trattato
come positivo anche in assenza di una
positività.Grazie
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