Agenti di biocontrollo: strategie applicative - Vittorio Rossi - AgroNotizie
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Vittorio Rossi vittorio.rossi@unicatt.it Agenti di Patogeno BCA biocontrollo: strategie applicative Pianta Ambiente Bologna, 22 novembre 2019
Prodotti fitosanitari ‘alternativi’ resistenza resistenza proteine, aa indotta Pianta indotta vegetali Trichoderma oligosaccaridi Ampelomyces Aureobasidium funghi microbiche cerevisane Pythium Microorganismi Sostanze (BCA) naturali animali chitosano Bacillus batteri minerali rame, zolfo bicarbonati parassitismo Patogeno tossicità antagonismo diretta competizione terpeni Botanicals oli essenziali
Trichoderma: principali caratteri Ife: filamentose, fortemente ramificate, a rapida crescita Fialidi: sono strutture a forma di fiasco on cui si formano i conidi Conidi: di colore https://en.wikipedia.org/wiki/ M. Jedryczka verdastro, organi di propagazione prodotti in abbondanza T.Q. Qin P. Tang Clamidospore: organi di conservazione, capaci di sopravvivere a lungo
Trichoderma: metaboliti secondari Keswani et al., 2013; Applied Microbiology and Biotechnology 98: 533-544.
… e molto studiato
… e molto studiato
Interazioni pianta – patogeno - BCA
Interazioni pianta – patogeno - BCA and x
Interazioni pianta – patogeno – BCA Ciclo vitale e infettivo Stadio bersaglio MoA Patogeno BCA Pianta Ambiente Attività del patogeno Fitness del BCA Sfera di competenza del patogeno Sfera di colonizzazione
Interazioni pianta – patogeno – BCA Ciclo vitale e infettivo Stadio bersaglio MoA Patogeno BCA Pianta Ambiente Attività del patogeno Fitness del BCA Sfera di competenza del patogeno Sfera di colonizzazione
Meccanismi d’azione (MoA): Trichoderma Resistenza a Micoparassiti stress abiotici smo Induzione della Induzione di crescita resistenza Competizione Endofitismo per spazio e nutrienti Antibiosi
Meccanismi d’azione (MoA): Trichoderma Antibiosi
Meccanismi d’azione (MoA): Trichoderma Druzhinina et al., 2011; Nature Reviews Microbiology 9:749-759 Micoparassitismo Hubbard et al., 1993; Phytopathology 73:655-659 Gupta et al., 2014; Biotechnology and Biology of Trichoderma; Elsevier Ed.
Meccanismi d’azione (MoA): Trichoderma ü vita saprofoba ü adattamento a varie fonti nutrizionali ü elevata fitness ü breve ciclo vitale ü elevati tassi di crescita ü abbondante sporulazione Competizione Benítez et al., 2004; International Microbiology, 7: 249-260
Martinez-Medina et al., 2013; Frontiers in Plant Science 4(206):206 Induzione di resistenza Meccanismi d’azione (MoA): Trichoderma Druzhinina et al., 2011; Nature Reviews Microbiology 9:749-759 Perazzolli et al., 2012; BMC Genomics, 13:660
Interazioni pianta – patogeno – BCA Ciclo vitale e infettivo Stadio bersaglio MoA Patogeno BCA Pianta Ambiente Attività del patogeno Fitness del BCA Sfera di competenza del patogeno Sfera di colonizzazione
Il patogeno target Inoculo primario Forme Inoculazione svernanti Sporulazione Colonizzazione inoculo secondario epifitica Colonizzazione endofitica / infezione
Il patogeno target Inoculo primario Forme Inoculazione svernanti Sporulazione Colonizzazione inoculo secondario epifitica Quale fase del ciclo del patogeno Colonizzazione vogliamo endofitica / controllare? infezione
Il patogeno target Inoculo primario Forme Inoculazione svernanti Sporulazione Colonizzazione inoculo secondario epifitica Quale fase del ciclo del patogeno Colonizzazione vogliamo endofitica / controllare? infezione
Il patogeno target Inoculo primario Competizione Forme Inoculazione svernanti Parassitismo Sporulazione Colonizzazione Induzione R inoculo secondario epifitica Quale fase del ciclo del patogeno Colonizzazione vogliamo endofitica / controllare? infezione Competizione Antagonismo Parassitismo Induzione R Competizione
Inoculazione Infezioni latenti delle bacche Dispersione Penetrazione e invasione Colonizzazione residui fiorali Ascospore Produzione e dispersione conidi Apoteci Muffa grigia Conidi sui grappoli Sclerozi Mummie Muffa grigia Botrytis cinerea
Infection pathways di B. cinerea 0: Infezione conidica dei grappolini erbacei Pre-fioritura I: Infezione conidica di stili e ovuli IIa: Infezione conidica di stami e petali Fioritura IIb: Infezioni latenti III: Colonizzazione dei residui fiorali Pre-invaiatura IV: Accumulo di conidi nei grappoli in via di sviluppo V: Infezione conidica durante la maturazione Post-invaiatura VI: Berry-to-berry infection
Infection pathways e difesa BBCH 53 57 65 71 77 81 89 A B C D 0 I I + II II 1 A IIIIII+ IV Riduzione della colonizzazione dei residui IV 2 B V + VI e prevenzione delle infezioni latenti 3 D4 D C Riduzione della colonizzazione 5 dei5 5 5 residui e della sporulazione Ridurre la sporulazione e prevenire le infezioni delle bacche Prevenire le infezioni delle bacche
Interazioni pianta – patogeno – BCA Ciclo vitale e infettivo Stadio bersaglio MoA Patogeno BCA Pianta Ambiente Attività del patogeno Fitness del BCA Sfera di competenza del patogeno Sfera di colonizzazione
Le sfere d’interazione Fillosfera ü Organi della pianta ü Ambiente chimico ü Ambiente fisico ü Microbioma ü Effetti antropici Caulisfera Residui vegetali Rizosfera
Le sfere d’interazione Colonizzazione della rizosfera ü Antagonismo verso soil inhabitant ü Parassitismo di soil transient Riduzione del potenziale d’inoculo soil-borne ü Induzione di resistenza Aumento della resistenza ai patogeni ü Effetto nutrizionale e biostimolante Aumento della crescita e della resistenza a stress abiotici
Le sfere d’interazione Colonizzazione della caulisfera ü Occupazione di nicchie (es tagli di potatura) Prevenzione dell’invasione da parte dei patogeni del legno
Le sfere d’interazione Colonizzazione della fillosfera e carposfera ü Occupazione di nicchie (es. microferite) ü Antagonismo verso microflora epifita ü Parassitismo di microflora epifita Riduzione del potenziale d’inoculo epifita ü Induzione di resistenza Aumento della resistenza ai patogeni ü Effetto biostimolante Aumento della resistenza a stress abiotici
Le sfere d’interazione Colonizzazione dei residui vegetali ü Occupazione di nicchie per patogeni saprofobi ü Parassitismo di forme di conservazione ü Riduzione della sporulazione Riduzione del potenziale d’inoculo air- e spash-borne
Interazioni pianta – patogeno – BCA Ciclo vitale e infettivo MoA Stadio bersaglio Patogeno BCA Pianta Ambiente Sfera d’infezione Infezione Sfera di colonizzazione Fitness del BCA
Ambiente e BCA Temperatura 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Botrytis cinerea 54-100 (100)% RH Candida 90-100 (100)% RH Aureobasidium Bacillus Trichoderma 60-100 (100)% RH Papiliotrema Alternaria 95-100 (100)% RH Rhodotorula 94-100 (100)% RH Clonostachys Fedele et al. 2019, Submitted
Ambiente e BCA 1,40E+09 Temperatura (°C) Dinamica delle UF di Trichoderma 1,20E+09 in rapporto alla temperatura e Unità formanti colonie 1,00E+09 umidità relativa successiva al 8,00E+08 trattamento 6,00E+08 4,00E+08 1,60E+09 2,00E+08 Umidità relativa (%) 1,40E+09 0,00E+00 Unità formanti colonie 1,20E+09 0 1 3 6 10 13 Giorni dopo il trattamento 1,00E+09 8,00E+08 15 20 25 30 35 6,00E+08 4,00E+08 2,00E+08 0,00E+00 0 1 3 6 10 13 Giorni dopo il trattamento 60 80 90 95 100
Nicchie ambientali Nicchie ambientali: ü definite come le condizioni ambientali necessarie per la presenza di una specie e il mantenimento della sua popolazione (Chesson et al., 2001). ü ampiamente usate in ecologia, non in fitopatologia. Le nicchie ambientali possono essere definite per qualsiasi patogeno e BCA, considerando gli intervalli di temperatura e umidità in cui la crescita è: - nulla (no growth); score 0, 100 - minimale (20-50%); score 2, 4 Relative humidity (%) 90 - considerevole (>50-80%); score 3, 3 - massimale (>80%); score 4. 80 70 2 1 60 0 50 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Temperature (°C)
Nicchie ambientali 100 90 4 Relative humidity (%) 4 80 3 70 3 2 1 60 2 B. cinerea 0 1 0 Trichoderma 50 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Temperature (°C) 100 2 3 4 1 90 Relative humidity (%) 0 80 70 60 Candida 50 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Temperature (°C)
Nicchie ambientali 100 100 100 90 (%) (%) 90 4 90 humidity Relative humidity (%) 80 4 80 humidity 80 3 70 Relative 70 3 2 70 60 Relative 1 60 2 B. cinerea 60 A 0 1 0 Trichoderma 50 50 0 5 10 15 20 25 30 35 A40 50 Temperature (°C) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 0 5 10 15 20 25 30 35 40 100 100 Temperature (°C) Temperature (°C) 2 3 4 100 1 100 90 90 (%) (%) Relative humidity (%) 90 0 90 1.0 Relative humidity (%) humidity 80 80 0.8 80 humidity 80 70 70 0.5 Relative 70 70 60 0.2 Relative 60 60 Candida 0.0 60 B 50 A50 B 500 5 10 15 20 25 30 35 4050 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Temperature (°C) Temperature (°C) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Temperature (°C) Temperature (°C) 100 90 1.0 )
Nicchie ambientali 100 90 4 Relative humidity (%) 4 80 3 70 3 2 1 60 2 B. cinerea 0 1 0 Trichoderma 50 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Temperature (°C) 100 2 3 4 1 90 Relative humidity (%) 0 80 70 60 Candida 50 0 5 10 15 20 25 30 35 40 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Temperature (°C) Temperature (°C)
Interazioni pianta – patogeno – BCA Ciclo vitale e infettivo MoA Stadio bersaglio Patogeno BCA Pianta Ambiente Sfera d’infezione Infezione Sfera di colonizzazione Fitness del BCA
Interazioni pianta – patogeno – BCA ü Condizioni ambientali e infezione; ü MoA dei BCA; ü timing dell’applicazione dei BCA (preventiva vs curativa); ü Condizioni ambientali e BCA. Fedele et al. 2019, Submitted
BBR control & BCAs: a simulation model … in diverse condizioni climatiche … ü Condizioni ambientali e infezione; ü MoA dei BCA; ü timing dell’applicazione dei BCA (preventiva vs curativa); ü Condizioni ambientali e BCA. Fedele et al. 2019, Submitted
BBR control & BCAs: a simulation model Le esigenze ambientali del BCA giocano un ruolo prevalente sull’efficacia di controllo, e contano per > 90% della variabilità delle simulazioni. Strains with diverse growth conditions or survival capabilities Fedele et al. 2019, Submitted
In conclusione … o … per iniziare Prodotti di grande interesse sia in biologico che in produzione integrata ✔ Strategie anti-resistenza ✔ Tempi di carenza ✔ Profilo tossicologico
In conclusione … o … per iniziare Prodotti di grande interesse sia in biologico che in produzione integrata ✔ Strategie anti-resistenza ✔ Tempi di carenza ✔ Profilo tossicologico Servono maggiori conoscenze ✔ Meccanismi d’azione ✔ Efficacia e persistenza d’azione ✔ Condizioni d’impiego ✔ Inserimento nelle strategie di difesa
In conclusione … o … per iniziare Prodotti di grande interesse sia in biologico che in produzione integrata ✔ Strategie anti-resistenza ✔ Tempi di carenza ✔ Profilo tossicologico Servono maggiori conoscenze ✔ Meccanismi d’azione ✔ Efficacia e persistenza d’azione ✔ Condizioni d’impiego ✔ Inserimento nelle strategie di difesa Serve ttrasferimento efficace ✔ Prodotto giusto, al momento giusto, in rapporto al target, alla strategia di difesa e alle condizioni ambientali
Grazie per l’attenzione
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