Misure di pH più rapide e affidabili Strumenti e tecniche per analisi accurate
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Life Science
Misure di pH più rapide e affidabili
Strumenti e tecniche per analisi accurate
Ottimizzare la ricerca
Life Science
Tutto sotto controllo!
Il controllo del pH nei campioni e nei reagenti è
essenziale per risultati accurati e riproducibili.
I sistemi biologici sono così sensi degli esperimenti e da oltre 65 anni risultati precisi e accurati servono
bili che anche variazioni apparen è un punto di riferimento negli stru strumenti ad elevate prestazioni,
temente insignificanti dell'ambiente menti di misura. il giusto elettrodo e la tecnica di
possono alterarne notevolmente Elevato numero di campioni, mi misura migliore. METTLER TOLEDO
il comportamento e modificare i crovolumi, sistemi chimici com offre un'ampia gamma di pHmetri
risultati. plessi e conformità alle normative e sensori altamente tecnologici per
METTLER TOLEDO conosce l'impor sono i fattori chiave nel campo rispondere alle esigenze di analisi
tanza di controllare la variabilità delle Life Science. Per ottenere in qualunque campo.
All'interno
Taratura
sensore
Scelta del sensore
Scelta dello strumento di misura
Tour virtuale nel campo delle Affidabilità e riproducibilità Verso un sicuro successo La taratura è essenziale
Life Science Misure accurate richiedono Una soluzione di misura speci Il vostro strumento risponde
Dalla R&S al prodotto finito, un'accurata pianificazione fica per ogni applicazione alle vostre esigenze?
l'accuratezza innanzitutto
Pagina 4 Pagina 6 Pagina 8 Pagina 10
2
Soluzioni per la misura del pH METTLER TOLEDO –
Semplicemente affidabili
Analisi del pH I vostri campioni hanno Efficienti sensori semi-micro Controllo della
La temperatura è un fattore volumi ridotti Piccoli, robusti e versatili contaminazione
critico I microsensori per pH rispon Per risultati sicuri
dono alle vostre esigenze
Pagina 12 Pagina 14 Pagina 16 Pagina 18
3
Qualità totale
Tour virtuale nel campo delle Life Science
Dalla R&S al prodotto finito
I rischi legati alle analisi sono presenti in qualsiasi fase dello sviluppo di un
nuovo farmaco, e ciascuno di tali rischi ha una potenzialità specifica di inter-
ferire negativamente sui tempi di commercializzazione del prodotto e sulla
sua qualità. Dai tamponi per cromatografia, elettroforesi ed enzimologia alla
composizione dei brodi di coltura e dei coloranti, tutto deve essere assoluta-
mente perfetto.
Nota per la sua accuratezza e precisione, METTLER TOLEDO offre un'ampia
gamma di strumenti di alta qualità che riducono i rischi legati alle analisi in tutte
le fasi del processo produttivo.
Tour virtuale nel campo delle Life Science R&S
1 milione di composti – ID target,
validazione target, identificazione e
Sviluppo pre Sviluppo clinico
ottimizzazione di potenziali molecole
clinico
Qualità e controllo
durante il processo
R&S Produzione Requisiti fondamentali per il pH
Accuratezza e precisione
Strumenti facili da usare
Strumentazione ad elevate prestazioni
Maggiore produttività
Rischi e costi legati agli errori
Falsi positivi/negativi
– Perdita di opportunità
– Fallimento nei test clinici
Strumenti complicati:
– Bassa efficienza
– Lunga formazione degli operatori
– Rischio di errori
Analisi del pH di scarsa qualità
– Spreco di campioni
4
Sviluppo preclinico Sviluppo clinico Produzione
100 composti 3 composti 1 composto
Farmacologia e tossicologia Fase I-III: studi sull'efficacia Qualità e controllo durante
dei farmaci il processo
Requisiti fondamentali per il pH Requisiti fondamentali per il pH: Requisiti fondamentali per il pH:
Accuratezza e precisione Accuratezza e precisione Massima accuratezza e precisione
Competenza ed efficienza Riferibilità e riproducibilità Rigoroso controllo di qualità
Riferibilità e riproducibilità Esperienza dell'utente Conformità normativa
Strumenti facili da usare Conformità normativa Assenza di tempi morti
Rischi e costi legati agli errori Rischi e costi legati agli errori: Rischi e costi legati agli errori:
Falsi positivi/negativi Mancata individuazione di effetti Errori di produzione non individuati
– Compromissione dei test clinici collaterali – Ritiro di lotti dal mercato
– Perdita di efficienza – Ritardo nel lancio sul mercato Risultati inaffidabili dei test di CQ
– Perdita di tempo – Ripetizione di intere serie di test – Fermo produzione o ritiro dei lotti
Scarsa qualità nella gestione della Mancanza di prove statistiche – Danno di immagine
documentazione – Ritardo nel lancio sul mercato
– Mancata conformità alle normative – Mancata approvazione del farmaco
– Rivalutazione dell'intero processo
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Affidabilità e riproducibilità
Affidabilità dei risultati
Accurata pianificazione
Manutenzione e tecniche appropriate
I problemi delle misure elettrochimiche in genere dipendono da un errato trattamento del sensore durante la
taratura, la conservazione, la manutenzione e l'uso quotidiano. Anche la freschezza dei tamponi, la tempe
ratura e le tecniche di riempimento e conservazione possono influire sui risultati.
Il sensore giusto
Considerando l'ampia gamma disponibile, scegliere il sensore più adatto alla vostra applicazione ridurrà i
tempi di risposta e garantirà risultati più accurati. Il sensore giusto riduce anche i tempi di manutenzione,
abbassa i costi di laboratorio e migliora l'ergonomia di utilizzo.
Uno strumento di misura di qualità
La qualità degli strumenti di misura elettrochimici influisce direttamente sulla riproducibilità dei risultati.
Quando si sceglie uno strumento occorre considerarne l'accuratezza, la semplicità di configurazione ed
uso, la resistenza, il livello di automazione e le funzioni di gestione dei dati.
6
Utilizzando gli strumenti giusti e seguendo alcune regole fondamentali
di manutenzione e taratura del sensore i vostri sistemi di misura elettro-
chimica garantiranno massima accuratezza e precisione.
Taratura e
manutenzione corrette
migliorano riproducibilità
e affidabilità.
Taratura del sensore
Scegliere il sensore adeguato
alla propria applicazione semplifica
standardizza e rende conforme
le procedure operative.
Scelta del sensore
Scegliere lo strumento
più adatto alle proprie
procedure operative.
Scelta dello strumento di misura
7
Verso un sicuro successo
Applicazioni nel campo delle Life Science
Soluzioni per qualsiasi applicazione
• Il pH dei tamponi è corretto?
• La composizione del brodo di coltura è corretta?
• Quali fattori critici influiscono sulle procedure operative?
La risposta a queste domande richiede una misura accurata dei para-
metri elettrochimici.
Esigenza Parametro Soluzione
Taratura accurata pH, conducibilità, ISE, ORP Pagina 10
Evitare o compensare gli effetti pH, conducibilità, ISE Pagina 12
della temperatura
Recipienti molto piccoli, ad pH, conducibilità Pagina 14
esempio piastre a 96 pozzetti
o tubi per NMR
Recipienti alti, come provette pH, conducibilità, ORP Pagina 16
per test e per centrifuga
Evitare la contaminazione del pH Pagina 18
campione
8
Volumi elevati Campioni piccoli La misura del pH di alcune tipolo
In genere volumi intorno ai 50 mL Elettrodi standard possono richie gie di campioni può essere dal pH
sono più semplici da misurare, dere quantità di campione troppo del campione stesso. Ad esempio
mentre quelli molto elevati, da elevate o non essere adatti per campioni proteici sono preparati
1 L o più, richiedono maggiore me recipienti di piccole dimensioni. a pH molto bassi e devono essere
scolamento durante la correzioni METTLER T OLEDO offre una successivamente neutralizzati
del pH. Agitando un liquido troppo gamma di sensori micro e se a pH 7 prima di ulteriori ana
rapidamente il valore del pH può mi-micro che risolvono questi pro lisi. Spesso il volume iniziale è
fluttuare, quindi occorre miscelare blemi (vedere pagine 14–17). < 500 μL; dopo un esperimento
a velocità bassa, ma costante. Alcune applicazioni con volumi la quantità finale può essere di
Tamponi e applicazioni a volume piccoli: 20–100 μL.
elevato comprendono: • Analisi di campioni di RNA
• Tampone citrato in immuno- tramite microarray
istochimica • Analisi PCR di campioni di DNA
• Tampone fosfato (PBS) in • Analisi di campioni proteici
biologia cellulare tramite immunoprecipitazione
• Tris HCl pH8,8 per gel di
acrilammide
• Tamponi TBE per elettroforesi
9
La taratura è essenziale
Misurazione e taratura
Scegliere lo strumento adatto ?
È facile commettere errori di taratura, ma seguendo alcune sem-
plici regole e, naturalmente, disponendo dello strumento corretto,
si possono ottenere risultati molto accurati.
SevenExcellence™
Per laboratori regolamentati e per
SevenCompact™ chi vuole un'automazione più
Ideale per le attività di laboratorio avanzata
di tutti i giorni
Lo strumento di misura giusto … offra il livello di sicurezza ade Le migliori soluzioni
Aumentate accuratezza e preci guato in fatto di gestione degli di manutenzione
sione scegliendo uno strumento utenti, password di protezione La manutenzione periodica au
che: ecc. menta l'accuratezza e la durata
… abbia limiti di errore e range … supporti le vostre esigenze di del vostro strumento. METTLER
di misura adeguati alle vostre conformità e automazione TOLEDO offre molte opzioni strut
applicazioni turate su misura per garantire che
… disponga di diversi algoritmi e Trovate lo strumento di misura più ogni strumento si comporti sempre
di un numero di punti di tara adatto alle vostre esigenze su in modo affidabile.
tura adeguato www.mt.com/pH
10Per tarature sempre perfette
• Utilizzare tamponi freschi
• Applicare le stesse condizioni
operative per taratura e misura
• Scegliere standard di taratura che
abbraccino il range di misura
previsto
• Effettuare taratura e misura alla
Suggerimenti per Suggerimenti per ISE
stessa temperatura
la conducibilità (elettrodi ionoselettivi)
• Usare gli standard a bassa • Usare sempre una soluzione
conducibilità (10; 84 μS/cm) di regolazione della forza
il più rapidamente possibile-re ionica (ISA) idonea, alla giusta
agiscono con la CO2 concentrazione
• Evitare le cariche elettrostatiche • Trattare l'ISE secondo le
del recipiente di misura istruzioni per l'uso
• Evitare le bolle d'aria
11Analisi del pH
Effetti della temperatura
La temperatura è un fattore critico
I risultati del pH sono corretti solo se si tiene conto della temperatura del
campione. Applicando semplici regole è facile ottenere risultati accurati
e riproducibili.
Compensazione automatica Compensazione manuale
della temperatura della temperatura
La compensazione automatica La compensazione manuale della
della temperatura funziona al temperatura è molto accurata, ma
meglio con campioni di dimen- richiede tempo.
sione standard. • Se la temperatura del campione
• Usare un sensore con sonda di è nota (recipiente termostatato),
temperatura integrata e attendere inserirla nelle impostazioni di mi
che il segnale sia stabile. La sura dello strumento.
compensazione automatica della • Quando si misurano campioni
temperatura funziona al meglio con temperatura diversa, la
con campioni superiori ai 10 mL. compensazione manuale può
• Tutti i sensori ''Pro'' InLab®, richiedere tempo perché occorre
InLab® Micro Pro, Science Pro modificare le impostazioni ad
ed Expert Pro, integrano sonde ogni variazione termica.
di temperatura che eliminano i
problemi legati ad errori di impo
stazione o mancata acquisizione
della temperatura.
• Per i sensori privi di sonda inte
grata usare una sonda separata.
12Il sensore deve rimanere insieme al campione.
Garantite la corrispondenza delle temperature conservando il sen
sore insieme ai campioni nel refrigeratore o nell'incubatore, oppure
a temperatura ambiente. Questo metodo assicura la massima ac
curatezza perché la membrana pH, il sistema di riferimento
e il campione hanno la stessa temperatura.
Misurate il campione,
non il sensore.
Quando i campioni sono molti
piccoli, il sensore può impiegare
tanto tempo a stabilizzarsi che la
sua temperatura può essere erro
neamente interpretata come tempe
ratura del campione. Dal momento
che la massa del campione è tra
scurabile rispetto a quella del sen
sore, per garantire che la tempe
ratura misurata sia davvero quella
del campione, occorre tempo.
La tecnologia dei sensori METTLER TOLEDO
al servizio della vostra applicazione
13I vostri campioni sono piccoli?
Soluzioni micro
Microsensori pH per tutte le esigenze
L'analisi di un campione è una sfida tanto più complessa quanto più il
materiale è raro o prezioso. I nuovi microsensori per pH di METTLER
TOLEDO si adattano a recipienti di qualsiasi misura e richiedono volumi
molto piccoli preservando campioni preziosi.
Meraviglie mini-tecnologiche Per fare in modo che eventuali
Il sensore conduttimetrico InLab® effetti della temperatura vengano
751-4mm include una sonda di corretti adeguatamente, seguire i
temperatura integrata, ma i mi consigli forniti nelle pagine 12 e 13.
cro-sensori pH sono troppo piccoli
per poterne contenere una.
InLab® Nano – InLab® Ultra-Micro – InLab® Micro –
tecnologia pH all’avanguardia un micro-sensore evoluto un classico testato e fidato
InLab® Nano misura il pH in vo Rispetto a InLab® Micro, questo InLab® Micro è ideale per mi
lumi fino a 5 µL. L’ago in acciaio elettrodo dispone di un corpo più surare il pH in fiale e cuvette
non si rompe facilmente, nono corto di 40 mm per una manipo profonde grazie al corpo lungo
stante il diametro estremamente lazione più semplice e per evitare 60 mm. L’affidabilità di questo
piccolo di 1.7 mm. La punta in rotture. Il diaframma in ceramica prodotto, rigorosamente testato,
clinata protegge la membrana pH è collocato più in basso per con soddisfa la maggior parte delle
da danni meccanici, consentendo sentire di effettuare le misure in micro-applicazioni standard. È
al contempo l’utilizzo in setti. volumi fino a 15 µL. diventato un classico nella serie
InLab® Micro.
14InLab® 751-4mm – la micro- Volume minimo di campione nel recipiente specifico
conduttività diventa semplice pH Conducibilità
diametro diametro diametro diametro
1,7 mm 3,0 mm 3,0 mm 4,0 mm
® ® ® ®
Tipo di recipiente InLab InLab InLab InLab
Nano Ultra-Micro Micro 751-4mm
Provette piccole
50 μL 100 μL 200 μL 500 μL
> 2 mL
Provette di reazione LiteTouch
20 μL 25 μL 65 μL 300 μL
1,5 – 1,7 mL
Provette standard
20 μL 25 μL 65 μL 300 μL
0,5 mL
Piastre da 96 pozzetti
10 μL 20 μL 45 μL 150 μL
200 – 300 µL
Con un diametro di appena Piastre da 384 micro pozzetti
4 mm, InLab® 751-4 mm pre 5 μL 15 μL – –
5 – 100 µL
senta una sonda di temperatura
integrata che corregge le letture
inerenti la conduttività fino a una
temperatura di riferimento definita.
Per risultati precisi, immergere
il sensore fino al livello di im
mersione minimo indicato sulla
sonda.
15Piccoli, robusti e versatili
Soluzioni semi-micro
Efficienti sensori semi-micro
I sensori semi-micro sono estremamente maneggevoli da usare in provetta
o con altri recipienti piccoli. Il volume del campione è ancora relativa-
mente basso e i sensori semi-micro, con un diametro di 5–6 mm, miglio-
rano le condizioni operative.
InLab® Micro Pro – InLab® Semi-Micro – InLab® Redox Micro –
pH con compensazione analisi del pH senza manuten- semplice misura del potenziale
di temperatura zione o contaminazione redox
InLab® Micro Pro, con sensore di InLab® Semi Micro è dotato L'ORP (potenziale di ossidoridu
temperatura integrato, compensa dell'ultimo ritrovato nel settore de zione), noto anche come poten
automaticamente la temperatura gli elettroliti polimerici: XEROLYT® ziale redox, è un parametro fon
(vedere pagina 12). Con un corpo EXTRA. L'elettrolita polimerico e la damentale in biologia, facilmente
di appena 5 mm di diametro, è giunzione aperta semplificano al determinabile grazie a InLab®
un capolavoro della tecnologia. massimo uso e manutenzione. Redox Micro. Questo tradizionale
prodotto INGOLD utilizza una
anello in platino come elemento
sensibile.
16InLab® 752-6 mm – InLab® Flex-Micro –
sensore di conducibilità Sensore pH flessibile
semi-micro
L'elettrodo pH si piega ma non
si spezza, quindi nessun timore
di danneggiare i microelettrodi.
Rilassatevi, nessun movimento
sbagliato vi costringerà a sostituire
gli elettrodi. Un efficiente membro
del team.
Con un range di misura compreso
tra 1 μs/cm e 200 ms/cm, questo
speciale sensore di conducibilità
è un vero tuttofare, ideale per le
misure dirette in provetta o le mi
crotitolazioni. Il diametro di 6 mm
permette una profondità di immer
sione minima di appena 17 mm.
17Controllo della contaminazione
Controllo della contaminazione
per risultati sicuri
L'analisi dei campioni comporta sempre un rischio di contaminazione micro-
biologica, genetica o dovuta al trascinamento da un campione all'altro. Gli
elettrodi per pH convenzionali, inoltre, possono essere danneggiati quando si
analizzano tamponi TRIS o campioni proteici. Non gli elettrodi InLab®.
Evitate di contaminare Perché il tampone TRIS Gli elettrodi InLab® di METTLER
il sensore con i tamponi TRIS è dannoso? TOLEDO sono studiati proprio per
Una misura accurata del pH è fon Quando si misura il pH durante la essere compatibili con i tamponi
damentale per la qualità dei tam preparazione di un tampone TRIS il TRIS, e garantire risultati affidabili
poni. I tamponi TRIS, ampiamente diaframma ceramico degli elettrodi e valori accurati. L'elettrolita degli
utilizzati nella ricerca biologica, per pH convenzionali può ostruirsi elettrodi InLab® è privo di ioni ar
dalla biologia molecolare all'istolo in quanto il TRIS reagisce con gli gento, quindi esclude la possibilità
gia, possono danneggiare i sistemi ioni argento della soluzione di ri di contaminare la giunzione.
di misura pH standard. empimento. Questa reazione può
verificarsi anche con le proteine
presenti nel tampone, ad esempio
la BSA. La conseguenza è una
lettura lenta o instabile, se non un
risultato totalmente errato.
18Evitate la contaminazione tramite la misurazione
superficiale di campioni in gocce
Per evitare di contaminare i campioni (ad esempio con l'elettrolita),
pipettate una goccia (almeno 10 μL) dal campione principale e
analizzatene la superficie con un elettrodo a membrana piatta.
Occorrono solo un vetrino da microscopio e 10 μL di campione.
Eliminazione del rischio biologico
con autoclave e detergenti per
RNasi e DNasi
Gli elettrodi per pH InLab® Power,
Power Pro, Viscous e Viscous Pro
si possono sterilizzare in autoclave.
Pulendo prima il sensore con le
soluzioni decontaminanti per RNasi
e DNasi il potenziale di contamina
zione biologica viene ridotto sensi
bilmente.
19RAININ
Innovation for the Life Sciences
Pipet-Lite XLS and E4 XLS
I campioni della performance in formati a canale singolo,
multicanale e a distanziale regolabile
PureSpeed System
Questo pratico sistema semi-automatizzato a basso costo purifica
volumi di micro-dimensioni della proteina target.
Eccellente purezza rispetto alle tecnologie esistenti
u Elevata concentrazione – non sono necessari ulteriori incrementi
di concentrazione
u Elevata produzione – elabora fino a 12 campioni in parallelo
Per maggiori informazioni:
www.mt.com/rainin
www.mt.com/pH
Per ulteriori informazioni
Certificazione di qualità. Sviluppo, produzione
Mettler-Toledo AG, Analytical e sperimentazione a norma ISO 9001.
CH-8603 Schwerzenbach, Svizzera
Tel. +41 22 567 53 22
Fax +41 22 567 53 23 Sistema di gestione ambientale
a norma ISO 14001.
Soggetto a modifiche tecniche “Conformità Europea”. Il contrassegno di con
© 07/2013 Mettler-Toledo AG, 51725348A formità CE garantisce che i nostri prodotti sono
Marketing pH Lab / MarCom Analytical conformi alle direttive UE.Puoi anche leggere
