PAXgene Blood ccfDNA Tube 768165 - Becton Dickinson
←
→
Trascrizione del contenuto della pagina
Se il tuo browser non visualizza correttamente la pagina, ti preghiamo di leggere il contenuto della pagina quaggiù
it
PAXgene ®
Blood ccfDNA Tube
768165
eifu.bd.com
1I. Uso previsto
La provetta PAXgene Blood ccfDNA è destinata alla raccolta, alla conservazione e al trasporto di sangue intero venoso umano e alla stabilizzazione del DNA
per la preparazione di DNA libero circolante (ccfDNA) dal plasma e di DNA genomico (gDNA) dalla frazione cellulare nucleata.
II. Funzionalità del prodotto
Provetta PAXgene Blood ccfDNA 768165 CE-IVD • Dispositivo medico-diagnostico in vitro sterile, monouso
Volume di prelievo di 10,0 ml • 1,5 ml di additivo liquido provetta da 16 × 100 mm • 100 provette/scatola
Chiusura di sicurezza BD Hemogard™ Tappo blu • Protezione bianco perla
• Codice a barre 2D con numero di serie per identificare in modo univoco la singola provetta per il tracciamento dei campioni.
• Stabilità del ccfDNA e resa del gDNA comprovate, purezza e integrità: le provette PAXgene Blood ccfDNA Tube riempite di sangue possono essere
conservate per un massimo di 10 giorni a 2-25 °C, fino a 7 giorni a 2-30 °C o fino a 3 giorni a 2-37 °C prima del trattamento.
Nota: non conservare le provette riempite di sangue a una temperatura inferiore a 2 °C.
• Compatibile con i metodi di isolamento e purificazione del ccfDNA e gDNA basati su biglie magnetiche e membrana di silice.
• Isolamento e purificazione automatici del ccfDNA con il kit PreAnalytiX QIAsymphony PAXgene Blood ccfDNA utilizzando lo strumento
QIAGEN® QIAsymphony® SP.
• Isolamento e purificazione manuali del ccfDNA con il kit QIAGEN QIAamp® DSP Circulating Nucleic Acid.
• Isolamento e purificazione automatizzati del gDNA con i kit QIAGEN QIAsymphony DSP DNA Mini e Midi che utilizzano lo strumento QIAsymphony SP.
• Isolamento e purificazione manuali del gDNA con il kit QIAGEN QIAamp DSP DNA Blood Mini.
• Il ccfDNA purificato è compatibile con la PCR, comprese la PCR di metilazione convalidata dall'utente e metodi di test molecolari di sequenziamento
di nuova generazione (NGS).
• La resa e la qualità del gDNA purificato sono indicate per l'uso con metodi di test molecolari PCR e NGS convalidati dall'utente.
• La provetta PAXgene Blood ccfDNA è un dispositivo medico-diagnostico in vitro sterile di classe A (IVDR) conforme al regolamento della Commissione
europea (UE) n. 2017/746.
• Reagente: additivo di stabilizzazione ccfDNA (principio attivo: inibitore della caspasi,D. Procedura per il prelievo dei campioni
1. Assicurarsi che la provetta PAXgene Blood ccfDNA sia a temperatura ambiente
(15-25 °C) prima dell'uso.
2. Prelevare il sangue nella provetta PAXgene Blood ccfDNA seguendo la procedura
consigliata dalla propria struttura per la tecnica di puntura venosa standard. Inoltre,
seguire le istruzioni per la prevenzione del riflusso contenute nella Sezione IV.C.
3. Riempire la provetta fino al volume di prelievo massimo indicato. Continuare il prelievo di sangue fino a quando il vuoto nella provetta non si esaurisce
e il sangue non smette di fluire nella provetta prima di rimuoverla dal supporto.
4. Dopo il prelievo di sangue, capovolgere delicatamente la provetta PAXgene Blood ccfDNA 8 volte per miscelare il sangue con l'additivo.
Per un capovolgimento completo si intende un capovolgimento della provetta riempita e il ritorno in posizione verticale.
5. Conservare la provetta PAXgene Blood ccfDNA riempita a temperatura ambiente (15-25 °C). Per la stabilità del ccfDNA e la resa, la purezza e l'integrità del gDNA in
campioni di sangue conservati refrigerati (2-8 °C), a temperatura ambiente (15-25 °C), a 30 °C o a 37 °C, vedere la sezione Caratteristiche delle prestazioni.
E. Preparazione del plasma per l'isolamento del ccfDNA
Nota: per le provette che stabilizzano il ccfDNA sono consigliate particolari condizioni di centrifugazione che comprendono velocità, durata, temperatura
e frenata. Per prestazioni ottimali della provetta PAXgene Blood ccfDNA, utilizzare le condizioni seguenti per la preparazione del plasma.
Nota: per la manipolazione della provetta primaria (prelievo diretto del plasma dalla provetta PAXgene Blood ccfDNA) con lo strumento QIAsymphony SP,
vedere la Sezione F.
1. Centrifugare la provetta PAXgene Blood ccfDNA a temperatura ambiente (15-25 °C) per 15 minuti a 1.600-3.000 × g utilizzando una centrifuga bilanciata con
cestello basculante. Se si desidera frenare, si consiglia di utilizzare una frenata di livello medio convalidata per il proprio flusso di lavoro specifico.
Nota: per ottenere prestazioni ottimali con i campioni conservati refrigerati prima della centrifugazione, lasciare che le provette tornino a temperatura
ambiente prima del trattamento.
2. Pipettare il plasma in una provetta per centrifuga a fondo conico da 15 ml (non fornita), assicurandosi di non agitare la frazione cellulare nucleata.
3. Centrifugare la provetta per centrifuga a fondo conico da 15 ml a temperatura ambiente (15-25 °C) per 10 minuti a 1.600-3.000 × g utilizzando una
centrifuga bilanciata con cestello basculante.
Nota: non superare la velocità di centrifugazione massima consigliata dal produttore della provetta secondaria.
a. Per l'uso con il kit QIAsymphony PAXgene Blood ccfDNA:
Pipettare il volume di plasma richiesto in una provetta con fondo arrotondato in polistirene 17 × 100 mm da 14 ml assicurandosi di non
agitare il pellet cellulare residuo, se presente.
b. Per l'uso con il kit QIAamp DSP Circulating Nucleic Acid:
Pipettare il plasma in una provetta da 50 ml (non fornita), assicurandosi di non agitare il pellet cellulare residuo, se presente.
4. Elaborare il campione di plasma in conformità con le istruzioni fornite con il kit QIAsymphony PAXgene Blood ccfDNA o il kit QIAamp DSP Circulating
Nucleic Acid, oppure congelare il plasma (vedere la Sezione III. G. Conservazione del plasma).
Nota: per ottenere la massima resa di ccfDNA, elaborare il volume massimo di plasma disponibile.
Nota: evitare la formazione di schiuma nei campioni di plasma o su di essi. La presenza di schiuma o bolle d'aria nei campioni può portare al
pipettaggio di un volume di campione errato.
Nota: quando si confronta il rendimento del ccfDNA con altre provette per il prelievo di sangue, tenere conto della diluizione del plasma da parte
dell'additivo della provetta PAXgene Blood ccfDNA. Se si utilizzano volumi di sangue simili, le rese del ccfDNA saranno simili a quelle del plasma da
una provetta con K2EDTA essiccato per nebulizzazione, separato direttamente dopo il prelievo di sangue.
Nota: dopo aver trasferito il plasma per l'isolamento del ccfDNA, la restante frazione cellulare nucleata può essere utilizzata per isolare il gDNA, vedere la Sezione H.
Tabella 1: Condizioni di centrifugazione consigliate
Intervallo
Fase di Velocità ottimale di velocità Frenata
Tipo di centrifuga Provetta Durata (minuti) Temperatura Aliquotare in
centrifugazione (g o RCF) consigliato consigliata
(g o RCF)
Per la seconda
Centrifuga centrifugazione:
Temperatura
bilanciata Provetta PAXgene
1 1.900 1.600-3.000 15 ambiente Media provetta per centrifuga
con cestello Blood ccfDNA
(15-25 °C) a fondo conico da
basculante
15 ml (non fornita)
QIAsymphony
PAXgene Blood
ccfDNA Kit:
provetta con
fondo arrotondato
Provetta per
Temperatura in polistirene
Centrifuga centrifuga a fondo
2 1.900 1.600-3.000 10 ambiente Media 17 × 100 mm da 14 ml
bilanciata conico da 15 ml
(15-25 °C)
(non fornita)
QIAamp DSP
Circulating
Nucleic Acid Kit:
provetta da 50 ml
(non fornita)
F. Preparazione del plasma per l'isolamento del ccfDNA utilizzando la provetta PAXgene Blood ccfDNA come provetta primaria nello strumento
QIAsymphony SP
1. Centrifugare la provetta PAXgene Blood ccfDNA a temperatura ambiente (15-25 °C) per 15 minuti a 3.000 × g utilizzando una centrifuga bilanciata
con cestello basculante. Se si preferisce frenare, si consiglia di utilizzare una frenata di livello medio convalidata per il proprio flusso di lavoro specifico.
Nota: per ottenere prestazioni ottimali con i campioni conservati refrigerati prima della centrifugazione, lasciare che le provette tornino a temperatura
ambiente prima del trattamento.
2. Quantificare il volume di plasma in ciascuna provetta durante la rimozione dal cestello della centrifuga con PAXgene Blood ccfDNA Purification Protocol
Selection Tool (fornito con il kit QIAsymphony PAXgene Blood ccfDNA) in conformità con le istruzioni fornite nel manuale del kit QIAsymphony PAXgene
Blood ccfDNA e nella scheda del protocollo disponibili nella sezione Resources (Risorse) all'indirizzo www.qiagen.com o www.preanalytix.com.
Nota: se non si è verificata una chiara separazione del plasma dalla frazione cellulare o se gli strati sono stati accidentalmente miscelati dopo la
rimozione dalla centrifuga, ripetere la centrifugazione.
3. Rimuovere la chiusura di sicurezza BD Hemogard dalla provetta PAXgene Blood ccfDNA prima di posizionarla nello strumento QIAsymphony SP per
l'estrazione diretta del ccfDNA.
34. Sistemare le provette PAXgene Blood ccfDNA Tube che contengono plasma in quantità sufficiente direttamente nel supporto QIAsymphony
Sample Tube Carrier.
5. Elaborare la provetta in conformità con le istruzioni fornite per il kit QIAsymphony PAXgene Blood ccfDNA e i rispettivi protocolli.
G. Conservazione del plasma
1. Per la conservazione a breve termine, il plasma può essere conservato a 2-25 °C per un massimo di 3 giorni o a 2-8 °C per un massimo di 7 giorni.
2. Per la conservazione a lungo termine, aliquotare e congelare il plasma a −20 °C o −70 °C / −80 °C in provette criogeniche. Per la conservazione
a temperature inferiori a −20 °C, congelare dapprima i campioni di plasma a −20 °C per almeno 24 ore, quindi trasferirli a −70 °C o −80 °C. Il
ccfDNA è stabile nel plasma congelato per un massimo di 12 mesi. Per un elenco aggiornato delle caratteristiche delle prestazioni della provetta
PAXgene Blood ccfDNA, visitare il sito web www.preanalytix.com.
3. Scongelare le provette di aliquotazione a temperatura ambiente (15-25 °C).
Nota: non scongelare a temperature più basse (ad esempio 4 °C).
4. Se nel plasma si formano crioprecipitati, miscelare la provetta con vortex per 30 secondi dopo lo scongelamento e continuare in base alle istruzioni
fornite con il kit per l'isolamento del ccfDNA.
Nota: non è consigliabile centrifugare il plasma per rimuovere i crioprecipitati, perché potrebbero contenere ccfDNA.
Nota: per evitare la formazione di crioprecipitati, le provette possono essere scongelate per 30 minuti a 30 °C anziché a temperatura ambiente.
H. Preparazione della frazione cellulare nucleata per l'isolamento del gDNA
1. Dopo aver trasferito il plasma per l'isolamento del ccfDNA, la restante frazione cellulare nucleata può essere utilizzata per isolare il gDNA.
a. Preparare la frazione cellulare nucleata capovolgendo la provetta PAXgene Blood ccfDNA cinque volte (5×). Se si trasferisce solo il buffy coat,
non capovolgere la provetta PAXgene Blood ccfDNA.
2. Trasferire il volume richiesto di frazione cellulare nucleata in una provetta secondaria appropriata.
3. Diluire la frazione cellulare nucleata in un rapporto 1:1 di tampone fosfato salino privo di enzimi (aggiungere lo stesso volume di tampone fosfato
salino privo di enzimi rispetto al volume di frazione cellulare nucleata trasferita).
a. Per l'uso con il kit QIAamp DSP DNA Blood Mini:
Pipettare 200 µl di frazione cellulare nucleata diluita con tampone fosfato salino nella provetta di lisi fornita con il kit di estrazione.
b. Per l'uso con il kit QIAsymphony DSP DNA Mini o Midi:
Pipettare il volume richiesto (vedere le istruzioni del kit) di frazione cellulare nucleata diluita con tampone fosfato salino in una provetta
con fondo arrotondato in polistirene 17 × 100 mm da 14 ml.
4. I campioni devono essere trattati in conformità con le istruzioni fornite con il kit QIAamp DSP DNA Blood Mini o QIAsymphony DSP DNA Mini o Midi.
I. Conservazione della frazione cellulare nucleata della provetta PAXgene Blood ccfDNA
1. Per la conservazione a breve termine, la frazione cellulare nucleata può essere conservata a 2-25 °C per un massimo di 3 giorni o a 2-8 °C per un
massimo di 7 giorni.
2. Per la conservazione a lungo termine, trasferire il volume richiesto di frazione cellulare nucleata in una provetta criogenica. La frazione cellulare
nucleata proveniente dalla provetta PAXgene Blood ccfDNA può essere conservata a −20 °C o a temperatura inferiore. Il gDNA è stabile nella
frazione cellulare nucleata congelata per un massimo di dodici mesi, compresi 3 cicli di congelamento/scongelamento. Per un elenco aggiornato delle
caratteristiche delle prestazioni della provetta PAXgene Blood ccfDNA, visitare il sito web www.preanalytix.com.
3. Scongelare la provetta criogenica a temperatura ambiente (15-25 °C).
4. Capovolgere delicatamente la provetta criogenica scongelata 10 volte.
V. Caratteristiche delle prestazioni
A. Volume del plasma
Le provette PAXgene Blood ccfDNA offrono volumi di plasma costanti durante la conservazione del sangue intero e la vita utile delle provette. Il sangue è stato
prelevato da soggetti adulti apparentemente sani e consenzienti, ed è stato conservato a varie temperature usando provette di varie età e scadenze del periodo
di validità. Il volume del prelievo è stato misurato per 1.865 provette da 326 donatori. Delle 1.865 provette, 1.862 (99,84%) hanno fornito ≥4,0 ml di plasma.
B. Riduzione al minimo del rilascio di DNA
L'additivo all'interno della provetta PAXgene Blood ccfDNA stabilizza i globuli bianchi e aiuta a prevenire il rilascio di DNA da queste cellule. La riduzione al
minimo del rilascio di DNA è stata dimostrata utilizzando un test qPCR convalidato per la sequenza di rDNA 18S. Sulla base degli studi di stabilità, il rilascio
di DNA dai globuli bianchi è ridotto al minimo nel sangue intero prelevato nella provetta PAXgene Blood ccfDNA per un massimo di 10 giorni a 25 °C, 7 giorni
a 30 °C e 3 giorni a 37 °C (Figura 1).
Figura 1. Riduzione al minimo del rilascio di DNA nel plasma da campioni di sangue conservati nella provetta PAXgene Blood ccfDNA
6
5
Resa relativa rispetto al giorno 0
Variazione della resa di ccfDNA plasmatico dopo la conservazione dei
4 campioni di sangue intero rispetto al plasma separato entro 2 ore dal
prelievo di sangue (giorno 0). Il sangue è stato prelevato da soggetti adulti
apparentemente sani che hanno fornito il proprio consenso, ed è stato
3 conservato per 10 giorni a 25 °C (n = 141), 7 giorni a 30 °C (n = 261) e 3 giorni
a 37 °C (n = 144), seguiti da centrifugazione in provetta e purificazione del
ccfDNA dal plasma utilizzando il kit QIAsymphony PAXgene Blood ccfDNA
2 nello strumento QIAsymphony SP o il kit QIAamp DSP Circulating Nucleic
Acid. La resa relativa di ccfDNA è stata calcolata come il rapporto tra i numeri
di copie di rDNA 18S dopo la conservazione dei campioni rispetto ai numeri di
1 copie al giorno 0. Sono indicate le mediane e il 25o e il 75o percentile.
0
25 °C 30 °C 37 °C
10 giorni 7 giorni 3 giorni
4C. Conservazione del ccfDNA
L'additivo all'interno della provetta PAXgene Blood ccfDNA stabilizza il ccfDNA. La conservazione del ccfDNA è stata dimostrata utilizzando un test qPCR
convalidato per la sequenza DYS14 del DNA del cromosoma Y. Sulla base degli studi di stabilità, il ccfDNA del cromosoma Y DYS14 rimane stabile nel sangue
intero prelevato nella provetta PAXgene Blood ccfDNA per un massimo di 10 giorni a 2-8 °C, fino a 10 giorni a 25 °C, fino a 7 giorni a 30 °C o fino a 3 giorni a
37 °C (Figura 2).
Figura 2. Conservazione della resa del ccfDNA nel plasma da campioni di sangue conservati nella provetta PAXgene Blood ccfDNA
4
Variazione della resa di ccfDNA plasmatico del cromosoma Y DYS14 dopo
Resa relativa rispetto al giorno 0
la conservazione dei campioni di sangue intero rispetto al plasma separato
3 entro 2 ore dal prelievo di sangue (giorno 0). Il sangue è stato prelevato da
soggetti adulti apparentemente sani che hanno fornito il proprio consenso,
di cui 10 di sesso maschile e 26 di sesso femminile. Il sangue maschile è
stato trattato entro 2 ore dal prelievo di sangue, e il plasma è stato messo
2 in pool. 500 µl di plasma maschile sono stati aggiunti a ciascun campione
di sangue femminile da 10 ml entro 2 ore dal prelievo di sangue. I campioni
di sangue intero (femminile) sono stati conservati a varie temperature per il
numero indicato di giorni, seguiti dalla centrifugazione della provetta e dalla
1 purificazione del ccfDNA dal plasma utilizzando il kit QIAsymphony PAXgene
Blood ccfDNA nello strumento QIAsymphony SP. La resa relativa di ccfDNA è
stata calcolata come il rapporto tra i numeri di copie di DYS14 del cromosoma
Y dopo la conservazione dei campioni rispetto ai numeri di copie al giorno 0.
0 Sono indicate le mediane e il 25o e il 75o percentile.
2-8 °C 25 °C 30 °C 37 °C
10 giorni 10 giorni 7 giorni 3 giorni
D. Resa di ccfDNA relativa a DNA da plasma ottenuto da sangue con K2EDTA non stabilizzato
L'additivo di stabilizzazione all'interno della provetta PAXgene Blood ccfDNA mantiene la resa di ccfDNA. Le caratteristiche delle prestazioni della provetta
PAXgene Blood ccfDNA per la resa di ccfDNA sono state dimostrate utilizzando un test qPCR convalidato per la sequenza di rDNA 18S. Se si utilizzano volumi
di sangue simili, le rese del ccfDNA dal plasma ottenuto da sangue prelevato nelle provette PAXgene Blood ccfDNA Tube saranno simili a quelle del plasma
ottenuto da sangue prelevato in provette con K2EDTA essiccato per nebulizzazione utilizzando il kit QIAsymphony PAXgene Blood ccfDNA nello strumento
QIAsymphony SP o il kit QIAamp DSP Circulating Nucleic Acid (Figura 3).
Figura 3. Resa relativa di ccfDNA da plasma di PAXgene Blood ccfDNA rispetto al plasma con EDTA al giorno 0
4
Resa relativa di ccfDNA da plasma della provetta PAXgene Blood ccfDNA
Resa relativa rispetto al giorno 0 EDTA
rispetto al plasma con EDTA. Il sangue è stato prelevato da soggetti adulti
apparentemente sani e che hanno fornito il proprio consenso usando provette
3
con K2EDTA o provette PAXgene Blood ccfDNA Tube. Il plasma delle provette
è stato trattato mediante centrifugazione entro 2 ore dal prelievo di sangue.
La purificazione manuale del ccfDNA è stata effettuata per 120 donazioni
di sangue sia per le provette PAXgene che per le provette con K2EDTA con
2 il kit QIAamp DSP Circulating Nucleic Acid. La purificazione automatica
è stata eseguita per 200 donazioni di sangue dal plasma della provetta
PAXgene Blood ccfDNA utilizzando il kit QIAsymphony PAXgene Blood ccfDNA
e dal plasma delle provette con K2EDTA utilizzando il kit QIAsymphony DSP
1 Circulating DNA nello strumento QIAsymphony SP. Il ccfDNA è stato analizzato
per il gene target rDNA 18S. La resa di ccfDNA è stata calcolata come
rapporto tra il numero di copie di rDNA 18S tra il ccfDNA di PAXgene e quello
del ccfDNA delle provette con K2EDTA. Sono indicate le mediane e il 25o e il
75o percentile.
0
QIAsymphony QIAamp
E. Conservazione del gDNA
Le prestazioni della provetta PAXgene Blood ccfDNA per il gDNA sono state determinate misurando la resa, la purezza e l'integrità del DNA.
Dopo il prelievo di sangue nella provetta, il gDNA rimane stabile nel sangue intero per un massimo di 10 giorni a 25 °C, per un massimo di 7 giorni a 30 °C o
per un massimo di 3 giorni a 37 °C (Figure 4 e 5, Tabella 2).
Figura 4. Resa di gDNA di campioni di sangue conservati nella provetta PAXgene Blood ccfDNA
40
Resa totale gDNA (µg DNA)
30
La resa del DNA genomico (gDNA) (Figura 4) e la purezza (Tabella 2) sono
state determinate mediante spettrofotometria. Il sangue è stato prelevato da
un pool di donatori adulti apparentemente sani e consenzienti nelle provette
PAXgene Blood ccfDNA Tube. I campioni di sangue in ciascuna provetta, 120
20
per ciascuna condizione di conservazione, sono stati conservati a 25 °C, 30 °C
o 37 °C per il numero di giorni indicato. Le provette sono state centrifugate,
il plasma è stato rimosso e il gDNA è stato estratto da 400 μl di frazione
cellulare nucleata. Il gDNA è stato purificato utilizzando il kit QIAsymphony
10
DSP DNA Mini (volume di eluizione: 400 μl) nello strumento QIAsymphony SP.
Per la resa del gDNA, sono indicate le mediane e il 25o e il 75o percentile.
0
Giorno 0 25 °C 30 °C 37 °C
10 giorni 7 giorni 3 giorni
5Tabella 2: Purezza del gDNA dei campioni di sangue al giorno 0 e dopo la conservazione
Purezza
(A260/A280)
Giorno 10, Giorno 7, Giorno 3,
Giorno 0
25 °C 30 °C 37 °C
n 120 120 120 120
Media ± DS 1,83 ± 0,07 1,84 ± 0,06 1,84 ± 0,07 1,85 ± 0,06
Mediana 1,83 1,84 1,82 1,84
Scarto interquartile 1,79-1,86 1,80-1,88 1,79-1,87 1,81-1,88
95% dei campioni 1,68-1,98 1,71-1,98 1,69-1,98 1,71-1,98
Figura 5. Integrità del gDNA dei campioni di sangue conservati nella provetta PAXgene Blood ccfDNA
Il sangue è stato prelevato da 30 soggetti adulti apparentemente sani e consenzienti nelle provette PAXgene Blood ccfDNA Tube. Il gDNA totale è stato
purificato da 400 μl di frazione cellulare nucleata utilizzando il kit QIAsymphony DSP DNA Mini nello strumento QIAsymphony SP. Per ciascun soggetto, sono
stati separati 200 ng di gDNA mediante elettroforesi su gel di agarosio. È stato caricato un marcatore Lambda x Hind III nella corsia "M". La fascia superiore
di questo marcatore rappresenta un frammento di DNA lungo 23 kilobasi. Questa immagine rappresentativa mostra l'integrità del gDNA isolato dal sangue
intero conservato nelle provette PAXgene Blood ccfDNA Tube a 25 °C per 10 giorni.
VI. Limiti
1. La quantità di sangue prelevato deve essere di circa 10,0 ml per provetta PAXgene Blood ccfDNA, ma questo volume può variare a seconda di vari
fattori, quali l'altitudine, la temperatura ambiente, la pressione barometrica, l'età della provetta, la pressione venosa e la tecnica di riempimento.
2. La provetta PAXgene Blood ccfDNA non è concepita per l'uso con sistemi per il prelievo di sangue aperti (riempimento manuale della provetta con
rimozione della chiusura di sicurezza BD Hemogard) a causa del maggior rischio di esposizione al sangue e del rischio di generare un rapporto sangue-
additivo errato che potrebbe influire sulle prestazioni del prodotto. Il sangue deve essere prelevato direttamente nella provetta; oppure, se il sangue
viene prelevato e trasferito da una siringa, è necessario utilizzare un dispositivo di trasferimento.
3. La resa di ccfDNA e gDNA dipende dal paziente e dalla qualità del campione.
4. Destinato esclusivamente all'uso da parte di personale sanitario qualificato.
VII. Avvertenze e precauzioni
A. Avvertenze:
1. L'additivo liquido contenuto in questa provetta è un blando irritante e può causare irritazione agli occhi e alla pelle in caso di contatto diretto:
• In caso di contatto con la pelle, lavare la pelle con acqua e sapone. Se l'irritazione persiste dopo il lavaggio, consultare un medico.
• In caso di contatto con gli occhi, sciacquare gli occhi con acqua come precauzione. In caso di irritazione, rivolgersi a un medico.
• Dopo l'ingestione, sciacquare la bocca. In caso di malessere, consultare un medico.
2. Adottare le precauzioni universalmente accettate. Utilizzare guanti, camici, protezioni per gli occhi, altri dispositivi di protezione individuale e controlli
tecnici per proteggersi da schizzi di sangue, perdite di sangue e potenziale esposizione ai patogeni trasmissibili attraverso il sangue.
3. Trattare tutti i campioni di sangue e i dispositivi utilizzati per il prelievo di sangue (aghi, adattatori luer e set per il prelievo di sangue) in conformità
con le politiche e le procedure previste dalla struttura. In caso di esposizione al sangue (ad esempio, in caso di lesioni da punture di ago), rivolgersi
a un medico, poiché sussiste il rischio di trasmissione di epatite virale, HIV o altre malattie infettive. Dopo il prelievo di sangue, utilizzare eventuali
dispositivi integrati di protezione dall'ago forniti insieme al dispositivo per il prelievo di sangue. PreAnalytiX sconsiglia di riapplicare le protezioni agli
aghi usati; tuttavia, le norme e le procedure della struttura potrebbero differire e devono essere sempre seguite.
4. Con la provetta PAXgene Blood ccfDNA deve essere utilizzato un set per il prelievo di sangue (vedere la Sezione XII, Informazioni per gli ordini).
5. Le provette riempite possono essere soggette a rottura in caso di caduta da un'altezza superiore al banco di lavoro. Prestare attenzione quando
si maneggiano le provette riempite al fine di ridurre il rischio di possibile esposizione al sangue.
6. Si sconsiglia di trasferire un campione di sangue da una siringa con ago nella provetta PAXgene Blood ccfDNA a causa dell'aumento del rischio di lesioni
da punture di ago e del possibile rapporto sangue-additivo errato. Le provette riempite possono essere soggette a rottura in caso di caduta da un'altezza
superiore al banco di lavoro. Prestare attenzione quando si maneggiano le provette riempite al fine di ridurre il rischio di possibile esposizione al sangue.
7. Qualora il prelievo di sangue sia effettuato mediante una linea endovenosa (EV), assicurarsi che nella linea non sia presente nessuna soluzione EV
prima di iniziare a riempire le provette per il prelievo di sangue. Questa operazione è fondamentale per evitare risultati dei test di laboratorio errati
dovuti alla contaminazione da fluidi EV.
8. Dopo l'uso, smaltire tutte le provette e gli accessori per il prelievo di sangue in contenitori per materiali a rischio biologico appositamente approvati
per tale scopo.
9. Non riutilizzare le provette PAXgene Blood ccfDNA Tube.
10. Non utilizzare le provette PAXgene Blood ccfDNA Tube oltre la data di scadenza stampata sull'etichetta della provetta.
11. UE: gli utenti sono tenuti a segnalare qualsiasi incidente grave relativo al dispositivo al produttore e alle autorità nazionali competenti. Fuori dall'UE:
contattare il rappresentante BD locale per qualsiasi incidente o richiesta relativa al dispositivo.
B. Precauzioni:
1. Esaminare le provette prima dell'uso. Non utilizzare le provette in presenza di corpi estranei all'interno.
2. Poiché la provetta PAXgene Blood ccfDNA contiene un additivo liquido, è necessario prendere precauzioni per evitare l'eventuale riflusso dalla provetta
durante il prelievo di sangue (vedere la Sezione IV.C. Prevenzione del riflusso).
3. Non agitare né capovolgere energicamente la provetta per evitare l'emolisi.
4. Se le provette non vengono miscelate 8 volte subito dopo il prelievo, possono formarsi coaguli di sangue o fibrina. Questo può inoltre ridurre l'efficacia
della stabilizzazione del sangue, per la quale è necessaria la miscelazione con l'additivo subito dopo il prelievo per ottenere prestazioni ottimali.
5. Rimuovere le chiusure di sicurezza BD Hemogard ruotandole ed estraendole. Si sconsiglia di rimuoverle ruotandole con il pollice (per istruzioni
dettagliate, vedere la Sezione IX, Rimozione della chiusura di sicurezza BD Hemogard).
6. Dopo la puntura venosa, la parte superiore del tappo potrebbe contenere residui di sangue. Per evitare il contatto con questo sangue, prendere
precauzioni appropriate quando si maneggiano le provette.
67. Il riempimento insufficiente delle provette PAXgene Blood ccfDNA Tube potrebbe determinare un rapporto sangue-additivo errato e portare a risultati
delle analisi non corretti o a scarse prestazioni del prodotto.
8. Le endotossine non sono controllate. Il sangue e i componenti ematici raccolti e trattati nella provetta non sono destinati all'infusione o
all'introduzione nel corpo umano.
9. Non utilizzare se il sistema a barriera sterile del prodotto o la confezione sono compromessi.
VIII. Conservazione
Conservare le provette PAXgene Blood ccfDNA inutilizzate a 4-25 °C. Sono consentite brevi escursioni termiche da −10 °C a 50 °C. L'additivo della provetta PAXgene
Blood ccfDNA può presentare una leggera colorazione gialla; questo non influisce sulle prestazioni dell'additivo. La provetta PAXgene Blood ccfDNA può presentare
una leggera colorazione blu-grigia; questo non influisce sulle prestazioni della provetta. Non usare le provette oltre la data di scadenza.
IX. Rimozione della chiusura di sicurezza BD Hemogard
1. Afferrare la provetta PAXgene Blood ccfDNA con una mano, posizionando il pollice sotto la
chiusura di sicurezza BD Hemogard (per una maggiore stabilità, posizionare il braccio su una
superficie solida). Con l'altra mano, ruotare la chiusura di sicurezza BD Hemogard spingendo
contemporaneamente verso l'alto con il pollice dell'altra mano SOLO FINO AD ALLENTARE IL
TAPPO DELLA PROVETTA.
2. Allontanare il pollice prima di sollevare la chiusura di sicurezza. NON utilizzare il pollice per estrarre
la chiusura di sicurezza dalla provetta. Se la provetta contiene sangue, vi è un rischio di esposizione.
3. Sollevare la chiusura di sicurezza allontanandola dalla provetta. Nel caso improbabile in cui
la protezione in plastica si separi dal tappo in gomma, NON RIMONTARE LA CHIUSURA DI
SICUREZZA. Rimuovere con cautela il tappo di gomma dalla provetta.
X. Reinserimento della chiusura di sicurezza BD Hemogard
1. Riposizionare la chiusura di sicurezza sulla provetta.
2. Ruotare e spingere verso il basso con decisione fino a quando il tappo non è completamente
reinserito. Il completo reinserimento del tappo è necessario affinché la chiusura di sicurezza
rimanga saldamente sulla provetta durante la manipolazione.
XI. Assistenza tecnica
In caso di domande relative alla provetta PAXgene Blood ccfDNA, contattare il rappresentante BD di zona o www.bd.com.
XII. Informazioni per gli ordini
Prodotti PreAnalytiX
PAXgene Blood ccfDNA Tube (100), CE-IVD / 768165
Contenuto: 100 provette per prelievo di sangue.
10,0 ml • 16 × 100 mm 1,5 ml di additivo Sterile, monouso
Chiusura di sicurezza BD Hemogard 100 provette/scatola CE-IVD
La provetta PAXgene Blood ccfDNA (CE-IVD) è disponibile in Europa e in alcuni Paesi al di fuori degli Stati Uniti. Per ulteriori informazioni, visitare il sito
web www.preanalytix.com.
QIAsymphony PAXgene Blood ccfDNA Kit (192), CE-IVD 768566
Per 192 preparazioni di un massimo di 2,4 o 4,8 ml di plasma umano ciascuna: Sono inclusi 2 cartucce di reagenti, rack per enzimi e accessori. Da
utilizzare con la provetta PAXgene Blood ccfDNA.
Per ordinare le provette o i kit PAXgene Blood ccfDNA:
Visitare il sito web: www.preanalytix.com
Prodotti BD*
Set per il prelievo di sangue BD Vacutainer UltraTouch Push Button 367364 (CE 0050)
Contenuto: ago 23G da 3/4 di pollice (0,8 × 19 mm), tubo da 12 pollici (305 mm) con adattatore luer. 50/scatola, 200/confezione
BD Vacutainer Safety-Lok™ Blood Collection Set 367281 US / 367286 (CE 0050)
Contenuto: ago da 21G da 3/4 di pollice (0,8 × 19 mm), tubo da 12 pollici (305 mm) con adattatore luer. 50/scatola, 200/confezione
BD Vacutainer One Use Holder 364815
Contenuto: confezione solo per diametri di 13 mm e 16 mm. 1000/confezione
* Questi numeri di catalogo rappresentano i prodotti tipici che possono essere utilizzati con la provetta PAXgene Blood ccfDNA.
Per ulteriori informazioni sugli accessori BD per il prelievo di sangue:
Visitare il sito web: www.bd.com
7Prodotti QIAGEN*
Per l'isolamento di ccfDNA:
QIAamp DSP Circulating Nucleic Acid Kit 61504 (50)
Contenuto: mini colonne QIAamp, buffer, RNA vettore, proteinasi K QIAGEN e provette
Per l'isolamento del DNA genomico:
QIAsymphony DSP DNA Kit / 937255 Midi (96) 937236 Mini (192)
Contenuto: cartucce di reagenti, rack per enzimi e accessori
QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit 61104 (50)
Contenuto: mini colonne di centrifugazione QIAamp, buffer, reagenti, provette, VacConnectors
* Questi numeri di catalogo rappresentano i tipici kit di preparazione dei campioni che possono essere utilizzati con la provetta PAXgene Blood ccfDNA.
Per ordinare i kit di preparazione QIAGEN:
Visitare il sito web www.qiagen.com/shop
BD - Servizio clienti
Argentina, Uruguay e Paraguay Finlandia Nuova Zelanda
Ordini: 0800.444.5523 Ordini: 358.9.88.70.780 Ordini: 0800.572.468
E-mail: crc_argentina@bd.com Fax: 358.9.88.70.7816 Fax: 0800.572.469
Ordini: tilaukset.fi@bd.com E-mail: nz_customerservice@bd.com
Australia
E-mail: bdsuomi@bd.com
Ordini: 1.800.656.100 Norvegia
Fax: 1.800.656.110 Francia Assistenza clienti: 64.00.99.00
E-mail: bd_anz@bd.com Ordini: 33.476.68.36.36 E-mail: bdnorge@bd.com
Fax: 33.476.68.36.93 Ordini: ordre.no@bd.com
Austria
E-mail: serviceclientbdf@bd.com
Ordini: 43.1.7063660 Sud-est asiatico
Ordini: commandesfr@bd.com
Fax: 43.1.706366011 Assistenza tecnica: vacutainerfr@bd.com E-mail: PAS.SEA@bd.com
E-mail: customercare.at@bd.com Ordini Indonesia: 622.1577.1920
Germania Ordini Malaysia: 603.2093.8788
Belgio
Ordini: 49.6221.3050 Ordini Filippine: 63.2478.8881
Ordini: 32.53.720,556 Fax: 49,6221.305,216 Ordini Singapore: 65.6861.0633
Fax: 32.53.720,549 E-mail: customercare.de@bd.com Ordini Thailandia: 662.646.1800
E-mail: orders.be@bd.com Ordini Vietnam: 848.3822.7409
India
Brasile Corea del Sud
Ordini: 91.124.3949390
Ordini: 0800.055.56,54 Ordini: bd_india@bd.com Ordini: 02.3404.3706
E-mail: consultoria_vacutainer@bd.com Fax: 02.3404.3785
Irlanda
Canada Tecnici: 02.3404.3706
(Aquilant Specialist Healthcare Services)
Assistenza tecnica: Korea_PAS@bd.com
Assistenza tecnica: 1.800.631.0174 Assistenza clienti: 353.1.404,8350
Ordini: 1.866.979.9408 Fax: 353,1.404,8352 Spagna, Portogallo e Andorra
Fax: 1.800.565.0897 E-mail: contactus@aquilantscientific.ie Ordini: 34.91.848.8174
E-mail: customer.service.canada@bd.com Assistenza clienti: 34.902.27.17.27
Israele (Lapidot Medical)
Europa centrale e orientale Fax: 34.91.848,8115
Assistenza clienti: 972.700.70.90.22 E-mail: info.spain@bd.com
Ordini: 48.22.377.11.11 E-mail: cs@lapidot.com
Fax: 48.22.377.11.02 Svezia
Ordini Bulgaria: info_bulgaria@bd.com Italia
Ordini: 46.8.775.51.00
Ordini Repubblica Ceca: info_czech@bd.com Ordini: 39.02.48240,500 Fax: 46.8.645.08.08
Ordini Croazia: info_croatia@bd.com Fax: 39.02.48240.775 Ordini: order.se@bd.com
Ordini Ungheria: info_hungary@bd.com Assistenza tecnica: 39,3450655140 Assistenza tecnica: bdsweden@bd.com
Ordini Polonia: info_poland@bd.com E-mail: ordini.it@bd.com
Ordini Romania: info_romania@bd.com Svizzera
Medio Oriente e Africa
Ordini Europa Sudorientale: Ordini: 41.61.485.22.24
info_balkan@bd.com Ordini: 971.45.592,555 Fax: 41.61.485.22.00
Ordini Serbia: info_serbia@bd.com Fax: 971.45.592.599 E-mail: infoch@bd.com
Ordini Slovacchia: info_slovakia@bd.com E-mail: EMA_PAS@bd.com
Regno Unito
Ordini Slovenia: info_slovenia@bd.com Paesi Bassi
Ordini: 0800,917.8776
Danimarca Ordini: 31.20.582.94.20 E-mail: bduk_customerservice@bd.com
Ordini: 45.43.43.45.66 Fax: 31.20.582.94.21
Ordini: orders.nl@bd.com USA
Fax: 45.43.96.56.76
Ordini: ordre.dk@bd.com Assistenza clienti: 800.631.0174
Assistenza tecnica: bddenmark@bd.com o www.bd.com.
E-mail: productcomplaints@bd.com
Assistenza clienti QIAGEN
Ordini www.qiagen.com/shop | Assistenza tecnica support.qiagen.com | www.qiagen.com
8Cronologia delle modifiche
Revisione Data Riepilogo delle modifiche
04 2020-05 • Aggiornamento delle informazioni sulle prestazioni e dei risultati dei test di stabilità di ccfDNA e gDNA per la conservazione di sangue intero
fino a 10 giorni a 2-25 °C, fino a 7 giorni a 2-30 °C o fino a 3 giorni a 2-37 °C prima del trattamento.
• Aggiornamento della raccolta e trattamento dei campioni per includere il congelamento e scongelamento della frazione cellulare nucleata.
• Aggiornamento in conformità alla norma ISO 20186-3:2019.
05 2021-03 • Uso previsto aggiornato.
•Aggiornamento della raccolta e trattamento dei campioni per includere le condizioni di centrifugazione e il trattamento nello strumento
QIAGEN QIAsymphony SP.
• Aggiornamento dei risultati dei test delle prestazioni per includere i dati sulla stabilità del ccfDNA.
• Aggiornamento dell'elenco dei kit di estrazione degli acidi nucleici ccfDNA e gDNA compatibili.
• Aggiornamento in conformità alla norma ISO 20186-2:2019.
06 2021-06 • Aggiunta del principio attivo nella Sezione II Funzionalità del prodotto.
9GLOSSARIO DEI SIMBOLI [L006715(05) 2021-04]
Alcuni simboli elencati di seguito potrebbero non essere applicabili a questo prodotto.
Solo per clienti negli USA: La legenda dei simboli è disponibile su bd.com/symbols-glossary
Simbolo Significato Simbolo Significato
Produttore
Lato alto
Rappresentante autorizzato per la Comunità europea
Data di produzione Non impilare
Data di scadenza Sistema a barriera sterile singola
Codice lotto Contiene o sono presenti ftalati: combinazione di di-2-etilesilftalato (DEHP)
e benzil-butil-ftalato (BBP)
Numero di catalogo
Smaltire separatamente
Indica che è necessaria la raccolta differenziata per i rifiuti di apparecchiature
Numero di serie
elettriche ed elettroniche.
Sterile
Marchio CE; indica la conformità tecnica alle norme europee
Sterilizzato con tecniche di trattamento asettiche
Sterilizzato con ossido di etilene Dispositivo per analisi decentrate (near-patient testing)
Sterilizzato mediante radiazioni
Sterilizzato a vapore o con calore secco Dispositivo per test autodiagnostico
Non risterilizzare Si applica solo agli Stati Uniti: "Attenzione: le leggi federali degli Stati Uniti limitano
la vendita del presente dispositivo ai soli medici o su prescrizione medica."
Non sterile Paese di produzione
La dicitura "CC" deve essere sostituita dal codice paese a due o tre lettere.
Non utilizzare se la confezione è danneggiata Ora raccolta
Tagliare
Percorso del fluido sterile
Sollevare qui
Percorso del fluido sterile (ossido di etilene)
Data raccolta
Percorso del fluido sterile (irradiazione)
Tenere lontano dalla luce
Fragile, maneggiare con cura
Generazione di gas idrogeno
Tenere lontano dalla luce solare
Perforazione
Tenere in luogo asciutto
Numero di sequenza iniziale della serie
Limite di temperatura inferiore
Limite di temperatura superiore Numero di sequenza finale della serie
Dispositivo medico
Limite di temperatura
Contiene sostanze pericolose
Limite di umidità
Marchio di conformità ucraino
Rischi biologici
Conforme ai requisiti FCC in base alla norma 21 CFR Parte 15
Non riutilizzare
Consultare le istruzioni per l'uso Certificazione UL per Stati Uniti e Canada
Per le istruzioni per l'uso elettroniche, il simbolo è accompagnato dall'URL.
Identificativo univoco del dispositivo
Attenzione
Contiene, o è presente, lattice di gomma naturale
Dispositivo medico-diagnostico in vitro
Controllo negativo
Controllo positivo
Contenuto sufficiente per test
PreAnalytiX GmbH, Feldbachstrasse, 8634 Hombrechtikon, CH
Solo a scopo di valutazione delle prestazioni IVD Australian and New Zealand Sponsors:
Becton Dickinson Pty Ltd., 66 Waterloo
Road Macquarie Park NSW 2113, Australia
Il prodotto non è pirogeno
Becton Dickinson Limited, 14B George Bourke
Drive Mt. Wellington Auckland 1060, New Zealand
Numero paziente
La provetta PAXgene Blood ccfDNA è prodotta nel Regno
Unito da BD per PreAnalytiX GmbH e distribuita da Becton,
Dickinson and Company, 1 Becton Drive, Franklin Lakes, NJ, USA 07417.
BD Hemogard™, BD Vacutainer®, Safety-Lok™ e UltraTouch™
sono marchi di Becton, Dickinson and Company o delle
sue affiliate; QIAamp®, QIAGEN® e QIAsymphony®
sono marchi di QIAGEN NV.
© 2021 PreAnalytiX GmbH. Salvo diverse indicazioni,
PreAnalytiX, il logo PreAnalytiX e tutti gli altri marchi
registrati sono di proprietà di PreAnalytiX GmbH, 2021-06
Hombrechtikon, CH. VDP40336(06)
10Puoi anche leggere
