IL POLO DELLE MICROALGHE - Microalghe, per il trattamento e la valorizzazione di reflui e sottoprodotti agro-zootecnici e caseari Bioeconomy ...

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IL POLO DELLE MICROALGHE - Microalghe, per il trattamento e la valorizzazione di reflui e sottoprodotti agro-zootecnici e caseari Bioeconomy ...
IL POLO DELLE MICROALGHE

    Microalghe, per il trattamento e la
valorizzazione di reflui e sottoprodotti agro-
             zootecnici e caseari
                 Venerdì, 25 febbraio 2021
         Bioeconomy dialogues, Rivolta d’Adda (CR)

                         Katia Parati
                    Istituto Spallanzani
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Parternariato
Istituto Sperimentale Italiano “Lazzaro Spallanzani” (IS)                        (Capofila)
Politecnico di Milano (POLIMI), Polo Territoriale di Cremona                     (Partner)
Università degli Studi di Milano Bicocca – DISAT (UNIMIB)                        (Partner)
Centro di Ricerca per le Produz. Foraggere e Lattiero Casearie (CREA-ZA)         (Partner)
Provincia di Cremona (PROV-CR)                                                   (Partner)
Ente Regionale per i Servizi all'Agricoltura e alle Foreste (ERSAF)              (Partner)
Camera di Commercio Industria Artigianato e Agricoltura di Cremona (CCIAA)     Cofinanziatore
Collaborazioni:                       Partner:

                                                 Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
IL POLO DELLE MICROALGHE - Microalghe, per il trattamento e la valorizzazione di reflui e sottoprodotti agro-zootecnici e caseari Bioeconomy ...
L’eccesso di Azoto: un problema di abbondanza

           Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
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L’eccesso di Azoto: un problema di abbondanza

Flussi globali di azoto in mangimi e granaglie

Milioni di ton…

                                       Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
IL POLO DELLE MICROALGHE - Microalghe, per il trattamento e la valorizzazione di reflui e sottoprodotti agro-zootecnici e caseari Bioeconomy ...
L’eccesso di Azoto: un problema di abbondanza

Impatti delle attività umane sul pianeta
                         Steffen et al., 2015 Science

            Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
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L’eccesso di Azoto: un problema di abbondanza

Emission NH3 ….

NH4+, NO3-, P, K, ecc.

                           Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
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La Direttiva Nitrati

             ORIGINE DELL’IDEA PROGETTUALE
• “European Nitrated Directives” (91/676/CEE)            Regione Lombardia
 • «Environmental Regulations» (DL 152/2006 e 205/2010).

   classificazione del 60% del
   territorio lombardo come “zona
   vulnerabile”

                                                     Provincia di Cremona

   classificazione del 56% del
   territorio provinciale come “zona
   vulnerabile”

                                     Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
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ORIGINE DELL’IDEA PROGETTUALE

Provincia di Cremona

-15,5% delle aziende iscritte ad ATECO (contro
il 6% della media Regione Lombardia) e 1.613
aziende che allevano 967.000 capi suini,
278.000 bovini e 1800 capi bufalini

-La digestione anaerobica ha trovato sul
territorio ampissima diffusione grazie al
programma di incentivazione dell'energia da
biogas con la presenza di più di 150 impianti a
biogas (più di un terzo di quelli Lombardia)

- Il lattiero-caseario della provincia è uno dei
settori industriali più rilevanti (10% dell’intera
produzione nazionale), leader regionale
nell’export di prodotti lattiero-caseari

                                             Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
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REFLUI (Es. Liquame, digestato, acque di lavaggio caseifici…)

SCARTI CASEARI (Es. scotta, latticello, latte di filatura…)

                                                    Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
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Tecniche di rimozione dell’N

Processi chimico/fisici
     – Strippaggio
     – Evaporazione
     – Filtrazione a membrana
     – Precipitazione

Processi biologici
     – Nitrificazione/denitrificazione
     – fitodepurazione
     – Processi innovativi (DENO2, PARNIT/Anammox, algae)

                                           Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Trattamento con alghe:Vantaggi
- Trattamento estensivo che sfrutta energia solare
- Alta efficienza fotosintetica (>20% PAR)                             Waste water
- Alta produttività
- Interazione alghe/batteri                                             treatment
- Recupero nutrienti, rimozione del COD
- Altri effetti:
      ▪ Disinfezione
      ▪ Rimozione microcontaminanti
      ▪ Rimozione metalli

                                     OPEN POND:
                                     58-68% di biomassa algale
                                     23-30% di batteri
                                     sul totale dei solidi sospesi
Munoz & Guieysse (2006)         Solimeno et al (2017)

Water research, 40(15), 2799-2815

                                                        Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Obiettivo del progetto
Realizzazione di un centro di sperimentazione (IL POLO DELLE MICROALGHE) per:

  ▪lo sviluppo di tecnologie innovative basate
  sull’impiego di microalghe e di progetti
  imprenditoriali finalizzati alla mitigazione
  dell’impatto dei reflui e sottoprodotti di
  origine zootecnica e agro-alimentare sul
  territorio

  ▪ trasformazione degli scarti in nuovi
  prodotti    (biomassa     microalgale)  da
  valorizzare in differenti settori già
  consolidati     (cosmetico,   mangimistico,
  energetico, agricolo) in un’ottica di
  economia circolare.
  ▪

                                        Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Bioraffineria
                                         Attività 2: Implementazione del Polo
                                                 CO2                                                                    cosmesi
 Sottoprodotti                                                             Processi di
lattiero-caseari                                                        trasformazione                                   mangimi

           Mat organico, Azoto, fosforo e sali                   Attività 3: Ricerca Sviluppo
                                                                 tecnologico e ottimizzazione                           energetico
                                                                 impiantistica

                                        Biomassa microalgale
    Reflui                                                                                                            bioplastiche
  zootecnici                                                               Processi di
                                                                        trasformazione

                                                                                                                biofertilizzanti
         Attività 6:
         comunicazione
         Attività 4: Formazione                  Effluente                                Attività 5: Servizi
         e Osservatorio

                                                                Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Implementazione del Polo

                                                                     Sistemi automatizzati per controllo
                                                                     temperatura, pH, luce…
Identificazione di pretrattamenti che
rendano i reflui adatti alla coltivazione delle
micraoalghe (separazione solido/liquido,
flocculazione..)

                                                  Centrifugazione   Sistemi di pre-concentrazione
            Liofilizzatore
                                                     Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Implementazione del POLO

Cascade Raceway Thin layer       Raceway open pond                 2 Flat panel

 2 scivoli inclinati, 10 X 1 m    A = 4 m2 (V =0,9 m3)       100 cm x 100 cm x 10 cm
Multilayer Photobioreactor                                20 Cylindric PBR

                                 500 Litri                               V =200 litri
                                 Lunghezza: 5 m                          Diametro: 30 cm

                                           Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Inaugurazione Parco Bioreattori, settembre 2019

   Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Test alla scala pilota – Impianto sperimentale

                                                             Average daily Temp °C Average daily irradiance W/m2
                                        35                                                                       400
                                        30                                                                       350
                                        25                                                                       300
                                                                                                                 250
                                        20

                                                                                                                       I (W/m2)
                               T (°C)
                                                                                                                 200
                                        15
                                                                                                                 150
                                        10                                                                       100
                                         5                                                                       50
                                         0                                                                       0
                                          15/4 29/4 13/5 27/5 10/6 24/6 8/7 22/7 5/8 19/8 2/9 16/9 30/9 14/10
                                                                             data

  Raceway                                                     Campagna sperimentale
  A = 3,8 m2 (V =0,9 m3),                                     • 2016: digestato diluito (1:5 → 1:3)
  • Mulino                                                    • 2017: refluo zootecnico
  • Controllo pH con CO2                                      • 2018: digestato non diluito
  • Alimentazione continua                                    Valutazione di:
                                                              • Nutrienti, COD
                                                              • Crescita algale

                                                    Azienda suinicola
                                                    (20.000 capi)

                                                                Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Test alla scala pilota – digestato diluito (2016) e tal quale (2018)

                                                Produttività:
                                                8.2 ± 8.5 gDM/(m2∙d) @2016
                                                6.2 ± 0.9 gDM/(m2∙d) @2018

                                                Chlorella, Scenedesmus, Chrococcus,
                                                Stigeoclonium
                                                Efficienze di rimozione:
                                                • NH4+-N: 95 ± 12 [%]
                                                • N: 52 ± 13 [%]
                                                • PO43--P: 80 ± 21 [%]
                                                • CODs: 45 ± 35 [%]

                                                Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Ricerca
Coltivazione di A. platensis (spirulina) su sottoprodotti lattiero
caseari
                                In collaborazione con caseificio Il Cigno, di
                                Agnadello (CR)
                                Prova di coltivazione di Arthrospira platensis
                                (spirulina) su scotta salata: prova alla scala
                                pilota (semi-batch)
                Crescita costante
                                    Parametro        Caratteristiche   Caratteristiche
                                                     Scotta            effluente

                                    pH               5,5               9
                                    COD (g/L)        50                0,5
             Rimozione Ntot: 76%    N-NO3 (mg/L)
Biostimolanti

Attività biostimolante delle microalghe
• con estratti acquosi da microalghe (5 g/L) coltivate su
medium standard e su reflui lattiero caseari sono stati
effettuati:
• TEST DI GERMINABILITA’ in vitro usando semi di crescione

•TEST DI BIOSTIMOLAZIONE in serra (spray fogliare in presenza
e assenza di concime) su specie orticole: basilico, lattuga, ravanello,
rucola
• TEST DI BIOSTIMOLAZIONE in pieno campo (spray fogliare in
presenza e assenza di concime) su specie di interesse industriale:
pomodoro, patata, orzo, canapa

                                 Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Biostimolanti

                Test di biostimolazione: effetti
Livello agronomico:                             Livello metabolico:
• Aumento produttività                          • Aumento del contenuto in:
                                                   ‐ carboidrati
• Miglior assorbimento di N                        ‐ clorofille e caroteni
                                                   ‐ polifenoli
                                                   ‐ oli essenziali
• Aumento della superficie fogliare
                                                   ‐ prolina
  e della biomassa radicale

• Miglior risposta agli stress
 (aumento della produzione di metaboliti
 coinvolti nei meccanismi di riparo)

                                           Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Saggio alimentare su
                        giovanili di Storione (Acipenser baeri)

                        Raccolta        e            Preparazione                Prova
Produzione biomassa                                  mangimi (10%                alimentare su
                        liofilizzazione
microalgale       (da                                di microalga)               giovani storioni
medium      sintetico
standard (MS), da
SCOTTA,        refluo             Collaborazioni esterne al Polo: AIA (Veronesi), Università di
zootecnico                        Almeria (Spagna) e Università di Milano

                                              Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Valorizzazione
                                      Mangimistica              della biomassa
         4. Feeding trials and growth performance of sturgeon
Monofactorial random design              9 treatments (diets)        tested in triplicate
• Fish                                        432 A. baerii (IBW 12.8 ± 0.4 g)
                                             randomly divided in 27 groups

• Experimental facilities                                       27 circular tanks
                                                                 (Volume 130 L)
                                                                RAS T 18.9 ± 0.6°C.
                                                                salinity 1± 0.02‰.
                                                                 DO 9.6 ±1.2mg/l.
                                                                   pH 8.1 ± 0.1.
                                                                  light–dark cycle 12:12

• Experimental protocol
     •   Fish/tank: 16
     •   Feed ratio: 3% g/w
     •   Feeding period: 6 weeks (6 days per week)
     •   Diets offered in two daily meals
     •   Fish were tank/group weighted every week
                                         Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
5. Feeding trials and growth performance

The following parameters were calculated per group over 40 days of feeding trial:
Feed intake during the trial
Specific growth rate (SGR): 100 x [(ln final body weight – ln initial body weight)/days]
Feed conversion ratio (FCR): Feed intake/weight gain
Fish Survival (%)                        Diet                  IBW (g) FBW (g)
                                                                                   Feed
                                                                                            SGR (%)   FCR
                                                                                                             SURVIVAL
                                                                                 Intake (g)                     %
                          M2- Control (algae free)              12,8    44,2       346,2     3,09     0,69     100
                          M3- Nannochloropsis, raw clean        13,3    46,5       346,5     3,13     0,75     85,4
                          M4- Nannochloropsis, raw pig          12,3    43,9       327,0     3,18     0,69     95,8
                          M5- Nannochloropsis, hydrol. clean    12,8    43,0       319,0     3,03     0,73     95,8
                          M6- Nannochloropsis hydrol. pig       13,4    48,2       354,7     3,20     0,65     95,8
                          M7- Scenedesmus, raw clean            12,5    40,8       320,1     2,96     0,71     97,9
                          M8- Scenedesmus, raw pig              12,7    40,5       319,8     2,90     0,72     100,0
                          M9- Scenedesmus, hydrol. clean        12,3    39,9       322,7     2,95     0,74     97,9
                          M10- Scenedesmus, hydrol. pig         12,6    40,2       329,5     2,90     0,75     97,9
                          M11-Arthrospira, clean                 13     43.4       334.4      3       0,80     87.5
                          M12-Arthrospira, whey                 12.7    42,1       324.1    26
                                                                                             3,1 ottobre
                                                                                                    0,76 2018
                                                                                                           97,9
                          M13-Scenedesmus/Chroococcus, pig      13.0    43,5       341,5     3,03     0,7      97,9
Mangimistica

All the experimental diets tested resulted to be able to ensure a balanced and
complete level of nutrients, suitable for the growth of sturgeon juveniles, conferring
high nutritional quality level of their fillet analogous to the control group fed by fish
meal/oil-based diet.

The best Final Body Weight (FBW) was found in sturgeon fed on hydrolyzed
N.gaditana grown on Organic Medium and the difference with the control resulted
statistically significant.
Dietary inclusion of microalgae induced an increase on microvilli length and
absorption surface.

                                           Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Valorizzazione– CH4
Biogas
Semplice da integrare
Si perde il vantaggio sulla rimozione dell’N    • Pretrattamenti (costi/benefici)
Basso valore aggiunto e bassa resa di metano    • Co-digestione
(100-200 Nm3_CH4/ton_DM)

                              +                        +

                           Obiettivo: Ottimizzare rapporto C/N
                                       della miscela

                                          Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
I servizi
CONSULENZA E PROGETTAZIONE                     RICERCA E SVILUPPO
• Realizzazione di impianti di microalghe      • Sviluppo di disegni sperimentali
  integrati ad attività agro-zootecniche o     • Realizzazione di test di crescita algale
  industriali                                    in scala laboratorio e in scala pilota.
• Analisi di mercato e studi di fattibilità    • Prove sperimentali di valorizzazione
• Consulenza amministrativa e redazione          delle microalghe nei settori della
  di business plan                               cosmesi, della mangimistica, del
• Progettazione di impianti di microalghe        tessile, delle bioplastiche e dei fito-
• Monitoraggio dei parametri di crescita         stimolanti

FORMAZIONE E COMUNICAZIONE
• Formazione del personale di enti e aziende che operano nel settore
• Pacchetti didattici di carattere tecnico-applicativo o divulgativo e laboratoriale per
  scuole, parchi naturali, fattorie didattiche

                                         Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
I servizi                                     ANALISI       CHIMICHE
                                                    CARATTERIZZAZIONE DELLE ALGHE
                                                                                    PER         LA

                                                    • Preparazione dei campioni (liofilizzazione e
                                                      macinatura)
MONITORAGGIO DELLA CRESCITA ALGALE
• Determinazione della concentrazione e della       • Analisi del contenuto in proteine, lipidi,
  purezza delle cellule algali in coltura             carboidrati, ceneri, acqua

• Analisi composti azotati, fosfati, Domanda        • Determinazione del profilo amminoacidico e
  Chimica di Ossigeno (COD) e Domanda                 degli acidi grassi
  Biochimica di Ossigeno (BOD)
                                                    • Determinazione del contenuto in pigmenti
• Determinazione dell’Ossigeno Disciolto (OD),        fotosintetici
  del pH e della T°C
                                                    • Determinazione di micronutrienti
• Analisi respirometrica e dell’efficienza
  fotosintetica della coltura microalgale (PAM)     • Determinazione di metalli pesanti

                                                    • Rilevazione di microcistine

                                              Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
I servizi                              ANALISI GENETICHE
                                               • Analisi trascrittomica completa
                                                 del      microbiota       presente
ANALISI MICROBIOLOGICHE
                                                 all’interno della coltura
• Determinazioni quantitative: Carica          • Caratterizzazione           specie-
  batterica totale; Enterobacteriaceae;          specifica di microalghe e batteri
  lieviti e muffe; Pseudomonas spp.;           • Analisi quanti-qualitativa in real
  Sporigeni aerobi totali; Sporigeni             time PCR per Archea, AOB,
  anaerobi solfitoriduttori; Escherichia         cianobatteri
  coli; Stafilococchi coagulasi positivi;      • Messa a punto di protocolli per
  Bacillus cereus
                                                 eventuali esigenze specifiche
• Determinazione               qualitative
  (presenza/assenza)     di     patogeni;
  Salmonella         spp.;        Listeria
                                               ALTRI SERVIZI
  monocytogenes.                               • Fornitura di inoculi
                                               • Crioconservazione e stoccaggio di ceppi algali
                                               • Test di citotossicità

                                             Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
Parati Katia
                                                           Valeria Mezzanotte

                                     Elena Ficara

         Aldo Tava
                        Grazie per l’attenzione !
                          katia.parati@istitutospallanzani.it             Ilaria Casadei

Barbara Pisaroni                                    Donatella Melani

                                        Bioeconomy Dialogues, 25 febbraio 2021
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