Genie Fast HIV 1/2 - Bio-Rad
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Genie™ Fast HIV 1/2
50 72330
25 72327
25 72347
DOSAGGIO IMMUNOCROMATOGRAFICO RAPIDO PER LA RILEVAZIONE
QUALITATIVA DEGLI ANTICORPI ANTI HIV-1 E ANTI HIV-2 IN CAMPIONI UMANI DI
SANGUE INTERO VENOSO, SANGUE INTERO CAPILLARE, SIERO O PLASMA.
883676 – 2016/01INDICE
1. USO PREVISTO ....................................................................................................3
2. RIEPILOGO E ILLUSTRAZIONE DEL TEST ........................................................3
3. PRINCIPI DELLA PROCEDURA...........................................................................3
4. REAGENTI ............................................................................................................4
5. AVVERTIMENTI E PRECAUZIONI .......................................................................5
6. CAMPIONI .............................................................................................................6
7. PROCEDURA ........................................................................................................6
8. LIMITAZIONI DEL TEST .....................................................................................10
9. CARATTERISTICHE DELLE PRESTAZIONI ......................................................11
10. RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI ..........................................................................17
2 [IT]1. USO PREVISTO
Il dosaggio Bio-Rad Genie™ Fast HIV 1/2 è indicato per essere utilizzato come test rapido
per la rilevazione degli anticorpi anti HIV-1 e anti HIV-2 in campioni umani di sangue intero
capillare, sangue intero venoso, siero o plasma.
Questo test rapido impiega la tecnica dell’immunocromatografia (ICT o a flusso laterale).
Il test è idoneo per essere utilizzato con algoritmi multitest concepiti per la convalida
statistica dei risultati dei test rapidi per l’HIV. Quando sono disponibili diversi test rapidi per
l’HIV, questi possono essere utilizzati con appropriati algoritmi multitest.
Nota: Le normative nazionali possono precludere l’utilizzo di test rapidi per lo screening
ematico e/o le analisi di routine.
2. RIEPILOGO E ILLUSTRAZIONE DEL TEST
La sindrome da immunodeficienza acquisita (AIDS) è una malattia infettiva di origine
virale, che si traduce in una grave immunodeficienza cellulare.
Sono stati isolati nei linfociti di pazienti affetti da AIDS o dai suoi prodromi due tipi di virus
correlati al genere dei lentivirus. Il primo, denominato HIV-1, è stato isolato in Francia e in
seguito negli Stati Uniti. Il secondo, denominato HIV-2, è stato isolato in due pazienti di
origini africane e si è dimostrato responsabile di un nuovo focolaio di AIDS in Africa
occidentale.
3. PRINCIPI DELLA PROCEDURA
Gli antigeni ricombinanti dell’HIV-1 gp120, gp41 e dell’HIV-2 gp36, coniugati con oro
colloidale, vengono assorbiti alla base di una strip di membrana di nitrocellulosa.
Gli antigeni dell’HIV-1 e dell’HIV-2 vengono immobilizzati nella zona test (T).
Gli anticorpi anti HIV vengono immobilizzati nella zona di controllo (C).
Quando viene depositato sul fondo della strip, il campione inizia a migrare per diffusione
capillare, reidratando l’antigene coniugato con oro.
In presenza di anticorpi anti HIV-1 e/o anti HIV-2, questi si legheranno agli antigeni
coniugati per formare un particolare complesso che verrà trasportato con la migrazione del
campione. Questo particolare complesso continuerà a migrare fino alla zona (T) e, verrà
catturato dagli antigeni dell’HIV-1 e dell’HIV-2 immobilizzati in questa zona per produrre
una strip rossa visibile nella zona (T). L’eccesso dell’antigene coniugato con oro
continuerà a migrare fino alla zona (C), dove verrà catturato dagli anticorpi anti HIV e
aggregato ad essi per produrre una strip rossa nella zona (C), che indicherà la validità del
test (prova della migrazione del campione).
In assenza di anticorpi anti HIV-1 o anti HIV-2 nel campione, non si formerà alcuna strip
rossa nella zona (T), ma l'antigene coniugato con oro continuerà a migrare da solo fino
alla zona (C), dove verrà catturato per produrre una strip rossa che indicherà la validità del
test (prova della migrazione del campione).
Fare riferimento al capitolo 7.
3 [IT]4. REAGENTI
4.1. Descrizione
Identificazione 72330 72327 72347
Descrizione
sull'etichetta (50 test) (25 test) (25 test)
Strip di
nitrocellulosa, la cui
base contiene
antigeni ricombinanti
dell’HIV-1 e dell’HIV-
Device 50 25 25
2 coniugati con oro,
antigeni dell’HIV-1 e
dell’HIV-2 nella zona
T e anticorpi anti HIV
nella zona C.
Diluente (per il
protocollo sangue
intero) 1 fiala 1 fiala 1 fiala
Diluent
Conservante: 5 ml 5 ml 5 ml
Azoturo di sodio
(< 0,1 %)
Pipetta di plastica
per il deposito di
Pipettes 50 50 50
siero, plasma e
sangue venoso
Pipette capillari di
plastica (senza
Microsafe 80 µl anticoagulante) per il 0 0 25
protocollo di prelievo
al polpastrello
Lancette sterili di
sicurezza con ago
Lancets per il protocollo di 0 0 25
prelievo al
polpastrello
Tampone imbevuto
Alcoopad di alcol per la 0 0 25
disinfezione cutanea
4.2. Requisiti di conservazione e trattamento
Questo kit deve essere conservato a una temperatura tra 2°C e 30°C.
Ogni articolo del kit Genie™ Fast HIV 1/2 conservato a una temperatura tra 2°C e 30°C
può essere utilizzato fino alla data di scadenza riportata sulla scatola.
Dopo l’apertura della confezione, la cassetta deve essere utilizzata entro 20 minuti.
La bottiglia di diluente può essere conservata a una temperatura tra 2°C e 30°C fino alla
data di scadenza del kit, anche dopo il suo primo utilizzo.
4 [IT]5. AVVERTIMENTI E PRECAUZIONI
Per uso diagnostico in vitro. Per uso professionale.
5.1. Precauzioni per la salute e la sicurezza:
• Questo kit di test deve essere maneggiato esclusivamente da personale
adeguatamente addestrato e qualificato nelle procedure di laboratorio e cosciente dei
potenziali rischi connessi. Indossare abbigliamento protettivo, guanti e protezioni per
occhi/viso adeguati e manipolare gli oggetti in maniera appropriata nel rispetto della
buona pratica di laboratorio.
• Versamenti biologici: I versamenti di materiale di origine umana devono essere trattati
come sostanze potenzialmente infettive.
• I versamenti non contenenti sostanze acide devono essere immediatamente
decontaminati, insieme all'area in cui è avvenuto il versamento, ai materiali e ad
eventuali superfici o apparecchiature contaminate, utilizzando un disinfettante chimico
appropriato, efficace per i materiali a potenziale rischio biologico relativi ai campioni
coinvolti.
• I versamenti contenenti sostanze acide devono essere adeguatamente assorbiti
(asciugati con un panno) o neutralizzati, l'area deve essere lavata con acqua e
asciugata; il materiale utilizzato per assorbire il versamento può richiedere lo
smaltimento come rifiuto a rischio biologico. L'area deve essere quindi decontaminata
con un disinfettante chimico.
• I campioni, i reagenti di origine umana e le apparecchiature e i prodotti contaminati
verranno smaltiti dopo la decontaminazione:
- mediante immersione in candeggina a una concentrazione finale del 10% di
ipoclorito di sodio (1 volume di candeggina per 10 volumi di liquido contaminato o
acqua) per 30 minuti;
- o mediante l’impiego dell’autoclave a 121°C per almeno 2 ore.
NOTA: Non collocare le soluzioni contenenti candeggina in autoclave.
• Procedere allo smaltimento di tutti i campioni e i materiali utilizzati per l'esecuzione del
test come potenzialmente infetti. I rifiuti di laboratorio, chimici o a rischio biologico
devono essere manipolati e smaltiti nel rispetto di tutte le normative locali, regionali e
nazionali.
• Non dimenticare di neutralizzare e/o mettere in autoclave le soluzioni o di lavare i rifiuti
o qualsiasi fluido contenente campioni biologici prima di smaltirli.
• Per le raccomandazioni su precauzioni e rischi correlati ad alcuni componenti chimici
del presente kit, consultare i simboli riportati sulle etichette e le informazioni fornite alla
fine delle istruzioni per l'uso. La scheda di sicurezza è disponibile all'indirizzo www.bio-
rad.com.
5.2. Precauzioni relative alla procedura
5.2.1. Preparazione
• Non mescolare, né unire reagenti appartenenti a numeri di lotto differenti all'interno
di un unico ciclo.
• Prima dell’utilizzo, è necessario attendere 30 minuti perché i reagenti si stabilizzino
a temperatura di laboratorio, se questa è diversa dalla temperatura di
conservazione.
• Non utilizzare reagenti scaduti.
5 [IT]• Utilizzare i reagenti in modo tale da prevenire la contaminazione.
• La qualità dei risultati dipende dalla misura in cui verrà rispettata la buona pratica di
laboratorio di seguito riportata.
• Dopo aver aperto la confezione, non lasciare la cassetta a contatto con l'aria per più
di 20 minuti prima di depositare il campione.
5.2.2. Elaborazione
• Utilizzare un nuovo cono di distribuzione o una nuova pipetta monouso, in
dotazione con il kit, per ogni campione.
• Non modificare la procedura di dosaggio.
• Il tempo di attesa tra l’ultimo deposito (campione o diluente) e la lettura non deve
superare i 30 minuti (vedere sezione 7.6 Interpretazione dei risultati)
• Leggere i risultati in buone condizioni di luce per evitarne un’errata interpretazione.
6. CAMPIONI
Prelevare un campione di sangue secondo le pratiche usuali. Il test deve essere effettuato
su campioni non diluiti di siero, plasma, sangue venoso o sangue capillare prelevato al
polpastrello. Il plasma e il sangue venoso vengono raccolti con i seguenti anticoagulanti:
EDTA-K2, litio eparina, ACD (Citrato-Destrosio).
Particelle o aggregati di fibrina in sospensione possono condurre a falsi positivi.
I trattamenti chimici, il riscaldamento o la diluizione del sangue possono alterare gli esiti e
fornire risultati non adeguati.
Se i campioni devono essere trasportati, confezionarli secondo le normative vigenti in
materia di trasporto di agenti eziologici.
I campioni freschi possono essere conservati a una temperatura tra 2°C e 8°C fino a 7
giorni se si tratta di siero e plasma e fino a 3 giorni per il sangue intero venoso, senza
interferenze sui risultati, siano questi positivi o negativi.
Il siero fresco e il plasma possono anche essere congelati e scongelati per un massimo di
3 volte, senza interferenze sui risultati, siano questi positivi o negativi.
Commento: NON UTILIZZARE SIERO O PLASMA FORTEMENTE EMOLIZZATI:
un’emolisi molto marcata può compromettere le prestazioni del test.
Non è stata riscontrata alcuna interferenza in campioni contenenti fino a 100 mg/l di
bilirubina, né in campioni lipemici contenenti fino a 30 g/l di trioleina, e in campioni
emolizzati contenenti fino a 5 g/l di emoglobina. Livelli anormalmente elevati di
albuminemia (100 g/l) possono condurre a falsi positivi.
7. PROCEDURA
7.1. Materiali necessari ma non forniti
Pipette o multipipette automatiche o semi automatiche, regolabili o fisse, per misurare e
depositare il campione.
7.2. Preparazione dei reagenti
Cassetta:
Ogni cassetta viene distribuita in confezioni di alluminio sigillate. (vedere 5.2.1)
Diluente per il protocollo sangue intero venoso o per il protocollo di prelievo al
polpastrello:
Questo tampone diluente è fornito in una bottiglia contagocce.
6 [IT]Materiali di consumo:
Le lancette, il tampone imbevuto di alcol e le pipette capillari di plastica, indicati per il
protocollo di prelievo al polpastrello, sono in dotazione con il kit 72347. Questo
materiale è monouso.
7.3. Procedura di dosaggio
Il rispetto della procedura sarà garantito da quanto segue:
7.3.1 Aprire la confezione e rimuovere la cassetta (il campione deve essere
depositato entro 20 minuti dall’apertura della confezione).
7.3.2 Porre la cassetta su una superficie orizzontale piana con la zona di deposito
circolare rivolta verso l’operatore.
7.3.3 Depositare il campione.
a) Protocollo plasma/siero: Depositare 80 μl di campione nella zona di deposito
circolare utilizzando una pipetta automatica, o 3 gocce* usando la pipetta di plastica
in dotazione con il kit. *Il numero di gocce viene definito in base alla viscosità del
campione.
• Depositare 80 µl usando • Leggere i risultati dopo
una pipetta automatica 10-30 minuti
10-30 min.
b) Protocollo sangue venoso: Depositare 80 μl di sangue nella zona di deposito
circolare utilizzando una pipetta automatica, o 2 gocce* usando la pipetta di plastica
in dotazione con il kit, quindi aggiungere 2 gocce di diluente mediante la bottiglia
contagocce fornita con il kit.
*Il numero di gocce viene definito in base alla viscosità del campione.
c) Protocollo di prelievo al polpastrello: Secondo la pratica di laboratorio, utilizzare
una lancetta per prelievo al polpastrello (Lancet) e l’apposita pipetta capillare di
plastica (Microsafe 80 µl) (entrambi i materiali di consumo in dotazione con il kit
72347), sfruttando l'azione capillare per raccogliere il sangue intero capillare.
Detergere il dito della persona da sottoporre a test con una salvietta antisettica. Attendere
che il dito sia completamente asciutto oppure asciugarlo con un tampone di garza sterile.
Utilizzando una lancetta sterile, pungere la pelle vicino al centro del polpastrello.
Raccogliere 80 μl di campione, appoggiando la pipetta capillare di plastica monouso
fornita in dotazione alla goccia di sangue finché la pipetta non è piena, quindi aggiungere
2 gocce di diluente mediante la bottiglia contagocce in dotazione con il kit. Attenersi alla
seguente procedura.
7 [IT]Passaggio 1:
Tenere la pipetta capillare di plastica da 80 μl (Microsafe 80 μl) in posizione orizzontale e
toccare la goccia di sangue con il puntale. L’azione capillare consentirà il prelievo
automatico del campione fino alla linea di riempimento per poi fermarsi.
Attenzione: Se la pipetta capillare non è piena ripetere la procedura
Passaggio 2:
Il sangue capillare prelevato al polpastrello deve essere sottoposto a test subito dopo la
raccolta.
Per espellere il campione, allineare il puntale della provetta alla zona di deposito circolare
e comprimere il bulbo. Se un campione non si espelle, tenere la provetta in posizione
verticale e far scorrere un dito sul foro di sfiato. A questo punto, allineare il puntale alla
zona di deposito circolare e comprimere il bulbo.
Depositare 80 μl di sangue capillare prelevato al polpastrello nella zona di deposito
circolare del dispositivo toccando leggermente la garza, e controllare il completo deposito
del volume della pipetta capillare, quindi aggiungere 2 gocce (~ 80 μl) di diluente usando
la bottiglia contagocce in dotazione con il kit, senza toccare la garza.
• Usando la pipetta capillare • Depositare • Aggiungere • Leggere i
(in dotazione con il kit), 80 µl della immediatamente risultati dopo
prelevare 80 µl di campione pipetta 2 gocce di 10-30 minuti
fino alla linea di riempimento capillare diluente
graduata 10-30 min.
(segno nero) e fermarsi Diluente
Evitare che eccessi di campione o di diluente fuoriescano dalla zona di deposito circolare.
7.3.4. Lettura
La lettura visiva può essere eseguita tra i 10 e i 30 minuti dopo l’ultimo deposito (campione
o diluente).
Attenzione: Leggere i risultati in buone condizioni di luce per evitarne un’errata
interpretazione.
7.4. Controllo qualità
Tutti i prodotti fabbricati e distribuiti da Bio-Rad sono coperti da un sistema di garanzia
qualità, dal ricevimento delle materie prime alla distribuzione del prodotto finito. Ogni batch
di prodotto finito è soggetto a un controllo qualità e viene distribuito solo se risponde ai
criteri di accettazione.
8 [IT]La documentazione relativa alla produzione e alla sperimentazione di ogni batch è
conservata presso l'azienda.
7.5. Criteri di validazione del test
La validità del test può essere letta nella zona di controllo (C):
Protocollo siero/plasma: perché il test sia valido, deve essere presente una strip rossa di
controllo (C).
Protocollo venoso e di prelievo al polpastrello: Perché il test sia valido, devono essere
presenti una strip rossa di controllo (C) e una zona circolare di deposito rossa.
Se le condizioni di validità non sono conformi, il test non è da considerare valido, la
cassetta deve essere smaltita e il test ripetuto con una nuova cassetta.
Interpretazione di un risultato non valido:
a) NON VALIDO (nessuna linea di controllo):
Se non è presente alcuna linea di controllo rosa/rossa nella zona di controllo (C), anche se
una linea rosa/rossa appare nella zona test (T), il risultato NON è VALIDO e il test deve
essere ripetuto.
Se il problema persiste, contattare il Supporto Tecnico di Bio-Rad.
b) NON VALIDO (macchia o sfondo);
Se i globuli rossi migrano nella zona test (T), o se l’area della banda della cassetta presenta
uno sfondo che potrebbe interferire con l’interpretazione del test di campioni negativi o
leggermente positivi, la cassetta non deve essere letta e il test deve essere ripetuto.
9 [IT]7.6. Interpretazione dei risultati
7.6.1 Risultato positivo: interpretazione
La formazione di una strip rossa (anche se di modesta intensità) nella zona test (T) dopo
un periodo di tempo tra i 10 e i 30 minuti, indica la presenza di anticorpi anti HIV-1 o anti
HIV-2.
Si raccomanda di attendere 10 minuti prima di leggere i risultati (anche se dovessero
apparire velocemente strip rosse nella zona test), per avere la conferma che la
colorazione si mantiene inalterata, prima di definire il risultato positivo.
Nessun risultato deve essere definito positivo oltre i 30 minuti.
Commento: Anche la presenza di eventuali strip di un rosso leggero nella zona test (T)
deve essere considerata e interpretata come un risultato positivo.
7.6.2 Risultato negativo: interpretazione
L’assenza di una strip rossa nella zona test (T) dopo 30 minuti indica che non è stata
rilevata la presenza degli anticorpi anti HIV-1 o anti HIV-2. Tuttavia, ciò non esclude la
possibilità di un’infezione da virus HIV a uno stadio iniziale.
Commenti: Mai interpretare i risultati dopo 30 minuti dall’ultimo deposito.
Nessun risultato deve essere definito negativo prima dei 30 minuti dall’ultimo deposito.
8. LIMITAZIONI DEL TEST
Si raccomanda di ripetere il test su tutti i campioni che inizialmente sono risultati positivi,
nel rispetto dei criteri descritti nel capitolo 7.
È necessario che i risultati di tutti i campioni che si sono rivelati positivi in modo
riproducibile vengano confermati attraverso un metodo adeguato (Western-Blot o
equivalente) per provare la presenza di anticorpi anti HIV.
Un risultato negativo indica che il campione testato non contiene anticorpi anti HIV
rilevabili dal test Genie™ Fast HIV 1/2.
Tale risultato non esclude la possibilità di un'infezione da HIV-1 o HIV-2. È infatti possibile
che bassi livelli di anticorpi non vengano rilevati se l’infezione risulta recente.
La variabilità del virus HIV-1 (gruppo M, gruppo O) e HIV-2 indica che non è possibile
escludere reazioni false negative.
L’assenza del virus HIV non è garantita da alcun metodo conosciuto.
Per conoscere anche i limiti collegati ai campioni, fare riferimento al capitolo 6.
10 [IT]9. CARATTERISTICHE DELLE PRESTAZIONI
9.1. Misurazione di precisione
Le prestazioni di Genie™ Fast HIV 1/2 sono state valutate presso cinque diversi centri clinici,
attraverso l'analisi di campioni prelevati da donatori di sangue, pazienti positivi al virus HIV e
gruppi di sieroconversione.
9.1.1. Studi di riproducibilità
a) Riproducibilità inter-dosaggio
• Lo studio sulla riproducibilità inter-dosaggio è stato condotto con 7 diversi campioni
di siero (1 HIV-negativo, 3 HIV-1 debole, moderato e forte, 3 HIV-2 debole, moderato
e forte) e 5 diversi campioni di sangue intero venoso (1 HIV-negativo, 2 HIV-1 debole
e forte e 2 HIV-2 debole e forte). L’analisi dei campioni per mezzo del reagente
Genie™ Fast HIV 1/2 è stata eseguita due volte al giorno per 5 giorni (10 repliche)
per il siero o una volta al giorno in triplicato per 3 giorni (9 repliche) per il sangue
intero venoso.
Per tutti i campioni testati, sia positivi che negativi, non sono state riscontrate
discordanze tra le repliche.
b) Riproducibilità inter-operatore
• Lo studio sulla riproducibilità inter-operatore è stato condotto con 5 campioni di
sangue intero venoso (1 HIV-negativo, 2 HIV-1 debole e moderato, 2 HIV-2 debole e
moderato) testati in triplicato da tre diversi operatori su due batch di reagente.
Per tutti i campioni testati, sia positivi che negativi, non sono state riscontrate
discordanze tra i tre operatori.
c) Riproducibilità inter-batch
• Lo studio sulla riproducibilità inter-batch è stato condotto su tre batch, con 5 campioni
di sangue intero venoso (1 HIV-negativo, 2 HIV-1 debole e moderato, 2 HIV-2 debole
e moderato) e 7 campioni di plasma (1 HIV-negativo, 2 HIV-1 debole e moderato e 4
HIV-2 debole, moderato e forte) testati in triplicato su ciascuno dei tre batch.
Per tutti i campioni testati, sia positivi che negativi, non sono state riscontrate
discordanze tra i tre batch.
9.2. Prestazione diagnostica
9.2.1. Diagnostica: studi specifici
a) Popolazione di donatori di sangue
• 2517 campioni provenienti dalla banca del sangue (1108 donatori di siero, 708 di
plasma e 701 di sangue intero venoso) sono stati testati con reagente Genie™ Fast
HIV 1/2. La specificità è stata del 99,5% (2505/2517) con un intervallo di confidenza
(CI) al 95% di [99,2 a 99,7].
11 [IT]Specificità dei Numero totale Positivi Specificità RR
CI 95 (%)
donatori di campioni ripetibili (RR) (%)
99,5
Siero (Gel, Act) 1108 5 [98,9; 99,9]
(1103 / 1108)
Plasma (EK2, 99,3
708 5 [98,4; 99,8]
HeLi, ACD) (703 / 708)
Sangue intero
99,7
venoso (EK2, 701 2 [99,0; 100,0]
(699 / 701)
HeLi)
99,5
Totale 2517 12 [99,2; 99,7]
(2505 / 2517)
b) Popolazione di pazienti ospedalizzati
• 1010 campioni prelevati a pazienti non affetti da virus HIV e provenienti da complessi
ospedalieri (428 di siero, 227 di plasma, 327 di sangue intero venoso e 28 di sangue
capillare prelevato al polpastrello abbinati a sangue venoso) sono stati testati con il
reagente Genie™ Fast HIV 1/2. La specificità totale era pari al 99,5% (1005/1010),
CI 95% [98,9 - 99,8%] con 99,3% (425/428) e 99,1% (225/227) rispettivamente per
siero e plasma, 100% per sangue intero venoso (327/327) e sangue capillare
(28/28).
Commento: Il sangue intero venoso e il sangue capillare prelevati agli stessi 28 pazienti
hanno prodotto risultati equivalenti.
Specificità per Numero
Positivi Specificità RR
pazienti totale di CI 95 (%)
ripetibili (RR) (%)
ospedalizzati campioni
99,3
Siero (gel) 428 3 [98,0; 99,9]
(425 / 428)
Plasma (EK2, 99,1
227 2 [96,9; 99,9]
HeLi) (225 / 227)
Sangue intero
100
venoso (EK2, 327 0 [98,9; 100]
(327 / 327)
HeLi)
100
Sangue capillare 28 (*) 0 [87,7; 100,0]
(28 / 28)
99,5
Totale 1010 5 [98,9; 99,8]
(1005 / 1010)
(*) campioni di sangue capillare abbinati a sangue intero venoso proveniente da 28
pazienti.
9.2.2. Diagnostica: studi di sensibilità
a) Campioni prelevati a pazienti positivi al virus HIV-1
• 1050 campioni da pazienti notoriamente affetti da virus HIV-1 (385 di siero, 301 di
plasma, 338 di sangue intero venoso e 26 di sangue capillare abbinati a sangue
venoso) sono stati testati con reagente Genie™ Fast HIV 1/2.
La sensibilità era pari al 100% (1050/1050), CI 95 [99,7 -100%] per i quattro tipi di
campioni (siero, plasma, sangue intero venoso e sangue capillare).
12 [IT]Commento: Il sangue intero venoso e il sangue capillare prelevato agli stessi 26 pazienti
hanno prodotto risultati equivalenti.
Sensibilità per Numero Numero di
pazienti affetti da totale di campioni Sensibilità (%) CI 95 (%)
HIV-1 campioni reattivi
Siero (gel) 385 385 100 (385/385) [99,1; 100]
Plasma (EK2, HeLi) 301 301 100 (301/301) [99,8; 100]
Sangue intero
338 338 100 (338/338) [99,9; 100]
venoso (EK2, HeLi)
Sangue capillare 26 (*) 26 100 (26/26) [86,3; 100]
100
Totale 1050 1050 [99,7; 100]
(1050/1050)
(*) campioni di sangue capillare abbinati a sangue intero venoso proveniente da 26
pazienti.
b) Campioni prelevati a pazienti positivi al virus HIV-2
• 101 campioni di siero e 8 di plasma fresco da pazienti trattati o non trattati per
un’infezione da virus HIV-2, testati con reagente Genie™ Fast HIV 1/2, sono tutti
risultati positivi.
La sensibilità era pari al 100% (109/109) con un intervallo di confidenza al 95% [96,7;
100].
Sensibilità per Numero di
Numero totale
pazienti affetti campioni Sensibilità (%) CI 95 (%)
di campioni
da HIV-2 reattivi
100
Siero 109 109 [96,7; 100]
(109 / 109)
c) Campioni prelevati a pazienti genotipizzati positivi al virus HIV-1
• 154 campioni di siero da pazienti infettati da un ceppo del virus HIV-1 di genotipo
noto (vedere la tabella seguente), testati con reagente Genie™ Fast HIV 1/2 sono
risultati positivi, producendo un valore di sensibilità pari al 100% (154/154) con
intervallo di confidenza al 95% [97,6- 100].
13 [IT]Numero di campioni
Genotipo Numero totale di campioni
reattivi
CRF01 9 9
CRF02 20 20
CRF05 1 1
CRF06 7 7
CRF08 1 1
CRF09 5 5
CRF10 1 1
CRF11 6 6
CRF12 1 1
CRF13 2 2
CRF14 6 6
CRF15 3 3
CRF19 3 3
CRF27 1 1
Sottotipo A 12 12
Sottotipo B 21 21
Sottotipo C 9 9
Sottotipo D 9 9
Sottotipo F 9 9
Sottotipo G 12 12
Sottotipo H 6 6
Sottotipo J 4 4
Sottotipo K 1 1
Gruppo O 5 5
Totale 154 154
Sensibilità: 100%
d) Campioni freschi prelevati a pazienti positivi al virus HIV-1 e HIV-2
• 113 campioni di siero fresco (provette SST2 con gel), 216 campioni di plasma fresco
(EDTA-K2/litio eparina), 243 campioni di sangue intero venoso (EDTA-K2/litio
eparina) e 26 campioni di sangue capillare fresco (prelevati da ≤ 1 giorno), da
pazienti notoriamente affetti da virus HIV-1 e 8 campioni di plasma fresco (EDTA-K2)
da pazienti notoriamente affetti da virus HIV-2 sono stati testati con reagente
Genie™ Fast HIV 1/2. Tutti i campioni sono risultati positivi, producendo un valore di
sensibilità pari al 100% a prescindere dal tipo di campione.
14 [IT]Sensibilità per
campioni freschi
Numero totale di Numero di
positivi al virus Sensibilità (%)
campioni campioni reattivi
HIV-1 e HIV-2 (≤ 1
giorno)
Siero HIV-1 (SST2 100
113 113
gel) (113 / 113)
Plasma HIV-1 (EK2, 216 100
224
HeLi) e HIV-2 (EK2) 8 (224 / 224)
Sangue intero
100
venoso HIV-1 (EK2, 243 243
(243 / 243)
HeLi)
Sangue capillare 100
26 26
HIV-1 (26 / 26)
100
Totale 606 606
(606 / 606)
e) Sensibilità nei gruppi di sieroconversione
• 31 gruppi commerciali di sieroconversione, 30 dei quali includevano 65 punti con
sieroconversione iniziale (*), e oltre 40 campioni rappresentanti una fase di peri-
sieroconversione (***), sono stati testati con reagente Genie™ Fast HIV 1/2 e con un
test rapido di confronto marcato CE.
Numero di
Numero di
campioni positivi
Numero totale di campioni positivi
Gruppi testati con test rapido di
campioni con Genie™ Fast
riferimento
HIV 1/2
marcato CE
Sieroconversione
118 80 83 (**)
(31 gruppi)
Sieroconversione
iniziale 65 30 33 (**)
(30 gruppi)
Peri-
40 37 37
sieroconversione
(*) Come definito nel documento UE sulle specifiche tecniche comuni (CTS: documento
UE C(2009) 9464 del 27 novembre 2009).
(**) In 3 gruppi di sieroconversione, il primo punto positivo è stato rilevato almeno un
punto prima sul Genie™ Fast HIV 1/2, mentre in 1 gruppo di sieroconversione, il
primo punto positivo è stato rilevato un punto più tardi rispetto al test rapido di
riferimento.
(***) Fase di peri-sieroconversione definita come ELISA di 4a generazione positiva con
poche bande sul dosaggio HIV-1 Western-Blot.
9.3. Specificità analitica
9.3.1. Studio della reattività crociata
• La specificità è stata inoltre valutata su campioni provenienti da 200 donne in
stato di gravidanza e 107 pazienti affetti da patologie non connesse all’infezione
da virus HIV (7 dengue, 3 filariosi, 5 bilharziosi, 4 leishmaniosi, 11 lupus
15 [IT]eritematoso, 10 malaria, 10 fattori reumatoidi, 9 influenza, 8 ANA (fattori anti-
nucleo), 10 epatite A, 10 epatite B, 10 epatite C, 10 HTLV). La specificità si è
rivelata del 100%, CI 95% [98,2 – 100] per le donne in gravidanza (200/200) e
97,2%, CI 95% [92,0 – 100] per le altre patologie (104/107) con tre risultati
positivi ripetibili (2 casi di malaria e 1 caso di epatite B).
9.4. Effetto gancio
• Non è stato osservato alcun effetto gancio con il reagente Genie™ Fast HIV 1/2
con una serie di diluizioni di campioni fortemente positivi agli anticorpi HIV-1 e
HIV-2: quattro campioni commerciali di siero positivo al virus HIV-1 e due
campioni di siero positivi al virus HIV-2 sono stati testati senza diluizione e dopo
una diluizione seriale (1/2; 1/5; 1/10; 1/20; 1/50; 1/100; 1/200; 1/500) nel siero
HIV-negativo.
16 [IT]10. RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI
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common technical specifications for in vitro-diagnostic medical devices, 2009/108/EC.
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Test: experience from four CDC studies. AIDS 20,1655-1660.
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lymphadenopathy syndrome. Lancet 1984, june, 1253-1256.
17 [IT]18 [IT]
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