Miglioramento genetico per la resistenza a Fusarium - Dipartimenti

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Miglioramento genetico per la resistenza a Fusarium - Dipartimenti
Alessandra Lanubile
Adriano Marocco
Lorenzo Stagnati

Dipartimento di Scienze delle Produzioni Vegetali Sostenibili
alessandra.lanubile@unicatt.it

  Miglioramento genetico per la
          resistenza a Fusarium
             verticillioides e alla
             contaminazione da
             fumonisine in mais
       Il contributo della ricerca per la gestione delle micotossine nella filiera mais,
                                   Piacenza, 8 Marzo 2019.
Miglioramento genetico per la resistenza a Fusarium - Dipartimenti
Presenza di fumonisine (µg kg-1)
                               nel Nord Italia (2012-2018)

Nel 2018 il 41 % dei campioni di mais nel Nord Italia ha mostrato livelli di
             contaminazione da fumonisine > 4,000 µg kg-1

                                % di campioni > 4000 ppb
                                                           100

                                                            80

                                                            60

                                                            40

                                                            20

                                                             0
                                                                 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018

             Locatelli, Giornata del mais, Bergamo 2019.
Miglioramento genetico per la resistenza a Fusarium - Dipartimenti
La prevenzione in campo

           Effettuare tempestivamente la semina
           Contenere gli stress biotici e abiotici (piralide)
           Raccogliere con umidità della granella non inferiore al 22-24%
           Essiccare la granella portando l’umidità a valori prossimi al 14%
           Scegliere fonti di resistenza genetica

Fonti: Reyneri et al, L’informatore Agrario 11-2016; Bertolini & Marocco, Quaderni della ricerca 155-2013.
Miglioramento genetico per la resistenza a Fusarium - Dipartimenti
Genetica e Genomica a
                            supporto della difesa
• Tecniche accurate per la fenotipizzazione del marciume della
  spiga provocato da F. verticillioides e contaminazione da
  fumonisine.

• Tecnologie genomiche per programmi di selezione assistita da
  marcatori (MAS) e studi di associazione genome-wide (GWAS).

• Marcatori, QTL e geni candidati per la resistenza.
Miglioramento genetico per la resistenza a Fusarium - Dipartimenti
Efficaci metodi di inoculazione

     Forchetta                   Stuzzicadenti                   Saggio su plantula

                                                                                                C

1       2        3   4     5        6     7

                                                                                                    I
0%      1-   4-      11-   26-     51-   76-
        3%   10%     25%   50%     75%   100%    Lanubile et al., 2017 Front. Plant Sci. 8, 1774.
Miglioramento genetico per la resistenza a Fusarium - Dipartimenti
Ampia variabilità fenotipica per la
                                                             resistenza a Fusarium in tre popolazioni
                                                                             di mais
               188 linee della popolazione                                                           302 linee del pannello
                      biparentale F3                                                                        Goodman
                                                                  1
               80                                                                                3           4        5       6   7
                                                                                            80

                                                                              N° di linee
   N° di RIL

               60

                                                                                            40
               40

               20                                                                           0
                        R                                S
                                                                                                     1       2    3       4   5
                    1   2   3    4      5      6         7
                                                                 401 linee MAGIC                                 Scala
                                Scala
                                                        60
                                                        50
                                            N° di RIL

                                                        40
                                                        30
                                                        20
                                                        10
                                                         0
                                                             1    2     3                   4            5
                                                                      Scala
Maschietto et al., BMC Plant Biology 2017; Stagnati et al., 2019 G3 9: 571-579; Septiani et al., Scientific Reports 2018 sottomesso.
Miglioramento genetico per la resistenza a Fusarium - Dipartimenti
MIGLIORAMENTO GENETICO E
                        GENOMICA: SELEZIONE ASSISTITA DA
                                MARCATORI (MAS)
Le analisi genetiche e genomiche consentono di identificare i geni
responsabili per il carattere di interesse, nonché i marcatori ed i QTL ad essi
associati.
In questo modo con la MAS si possono mettere a punto metodi di selezione
basati sul genotipo invece che sul fenotipo, individuando i geni di interesse e
tracciandone la presenza nella discendenza attraverso i marcatori molecolari
e i QTL.
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QTL PER LA RESISTENZA ALLA
                                                 FUSARIOSI DELLA SPIGA

                                                      Robertson-Hoyt et al., 2006
                                                      Ding et al., 2012
                                                      Maschietto et al., 2017

Lanubile et al., 2017 Front. Plant Sci. 8, 1774.
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STUDI DI ASSOCIAZIONE
                                                 GENOME-WIDE
•     È un metodo che permette di effettuare in modo rapido una ricerca dei marcatori a livello di
      intero genoma associati a un particolare fenotipo di interesse.
•     Nel GWAS il tipo di marcatore utilizzato è lo SNP.
                                                                   WRKY125
                                  Cytochrome P450
                                                    Chitinase B1

    Stagnati et al., 2019 G3 9: 571-579.
Miglioramento genetico per la resistenza a Fusarium - Dipartimenti
Step successivo:
                                Testare la resistenza a Fusarium negli ibridi in
                                              condizioni di campo

Produzione degli ibridi:

 50 derivanti dall’incrocio di linee resistenti di diversa
  origine (CO, Lo e Mp)

 430 incroci inbred ricombinanti (RIX) derivanti dall’incrocio
  a catena di RIL (MAGIC)
50 ibridi testati in campi sperimentali

La valutazione delle spighe di mais inoculate artificialmente è avvenuta in prove
replicate, in due località, per due anni consecutivi (2017/2018)
                S. Zenone, Lodi                         Tribiano, Milano

            Fusarium verticillioides                                Aspergillus flavus
1       2           3      4       5      6        7

0%   1-3%   4-10%       11-25%   26-50%   51-75%   76-100%
Step successivo:

                         Fusariosi ed accumulo di micotossine negli ibridi

                                            FER %
FER %

        t/ha                                                 AER %
               FUM ppm

                                  FER %
Step successivo:
                Valutazione della resistenza al Fusarium nei
                                  430 RIXs

1/3 dei RIX mostrava una resistenza al FER < al 4%.
Prospettive future

 Numerosi marcatori e QTL associati a geni candidati per la resistenza a Fusarium
  sono stati identificati e potranno essere piramidati in un singolo background
  genetico.

 Molti dei geni identificati sono connessi a vie metaboliche chiave per la riduzione
  dell’infezione da Fusarium, supportando il loro uso diretto attraverso approcci
  biotecnologici, come il genome editing.

 Le informazioni sui marcatori genetici, le linee e gli ibridi di mais resistenti
  all’infezione da Fusarium e all’accumulo di fumonisine sono disponibili ai breeders
  per programmi di miglioramento genetico.
Ringraziamenti

Paola Battilani
Paola Giorni

Scuola Superiore S. Anna (Pisa, Italy)
Mario Enrico Pè
Matteo Dell’Acqua

Department of Plant Biotechnology and
Bioinformatics, Ghent University, Belgium
Dirk Inzé

Department of Crop & Soil Sciences, North
Carolina State University, Raleigh, USA
Jim B. Holland
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