E' ora di conoscere il microbiota intestinale dei suini
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20/10/2017 “E' ora di conoscere il microbiota intestinale dei suini“ Telma Tucci – telmatucci@gmail.com “Microbiota intestinale è l’assieme di microorganismi viventi nell’intestino” “Microbioma riguarda il genoma di questi microorganismi.” telmatucci@gmail.com 1
20/10/2017 Foto: Prof.Poli,Milano Animali “Germ Free”: •Difficoltà di assorbimento •Assenza di trasformazione biochimiche •Deficienza di IgA •Scarsi livelli sierici di IgG •Mucosa intestinale sottile e poco differenziata •Dilatazione del ceco •Scarsa presenza di cellule infiammatorie in lamina propria •Scarso sviluppo tessuto linfoide locale telmatucci@gmail.com 2
20/10/2017 Microbiota Uomo: 9 milioni di geni = X 300 volte i geni delle cellule (Yang et ali, 2016) Microbiota Uomo: 9 milioni di geni = X 300 volte i geni delle cellule (Yang et ali, 2016) telmatucci@gmail.com 3
20/10/2017 Stomaco: Lattobacilli , Lieviti Piccolo Intestino: Enterococchi, Lattobacilli, Flavobatteri Grosso intestino: 1 -anaerobi non sporigeni: Bacterioides, Bifidobatteri, Fusiformi, Spiraliformi, eubatteri 2 - anaerobi facoltativi: Enterobatteri, Enterococchi, Lattobacilli, Bacilli Gram*, Sporigeni aerobici telmatucci@gmail.com 4
20/10/2017 Le cellule caliciformi producono mucina, la quale si organizza in un gel denso di proteoglicani molto retificato formando un rivestimento aderente interno ed un rivestimento esterno meno retificato. Il rivestimento esterno è molto colonizzato dai componenti del microbiota. La mucosa interna è fortemente impermeabilizzata nei confronti della colonizzazione o penetrazione batterica dovuto alla grande concentrazione di AMPs battericidi, così come le IgA secrete specifiche (sIgA), che si dislocano dalla superficie basolaterale, dove sono allacciate da un recettore presente nel rivestimento interno della mucosa. Defensine, catelicidine telmatucci@gmail.com 5
20/10/2017 L’importanza…. Le popolazioni microbiche scoperte con la genomica, non erano mai state “isolate” nelle piastre di Petri. Ogni grammo di feci suine contiene 10 10 unità Kim et Isaacson, 2012 telmatucci@gmail.com 8
20/10/2017 Principali Famiglie: Durante la lattazione: Baterioidetes Bacteroidaceae Clostridiaceae Firmicutes Lachnospiraceae Lactobacillaceae Enterobacteriaceae In svezzamento: Lactobacillaceae Ruminonoccaceae Veillonellaceae Prevotellaceae Frese et al.,2015 Quando inizia? telmatucci@gmail.com 9
20/10/2017 Microbiota,da cosa dipende: •Individuo specifico •Esposizione ambientale •Dieta (latte(glicani = oligosaccharidi)* •Genetica •Pressioni immunitarie Microbiota, climax: Dopo un certo periodo si raggiunge un “Climax” Vuol dire: la popolazione microbica rimane in una associazione stabile con l’ospite e la sua composizione è ugualmente stabile telmatucci@gmail.com 10
20/10/2017 Microbiota, cambiamento: •Con l’età •Con la dieta •Con lo stress •Con le malattie •Con gli antibiotici Microbiota, cosa serve: •Induce la produzione di AMPs •Stimola il sistema immunitario •Attività metabolica Trasporto d’acqua Ri-ciclo dei Sali biliari Produzione di Vit.K Produce fosfatase alcalina •Digestione Metabolismo dei carboidrati telmatucci@gmail.com 11
20/10/2017 La ricerca sta dimostrando che lo sviluppo di una popolazione microbica stabile nei suini richiede un'esposizione continuativa nei primi giorni di vita a microbi giusti. (Schmidt et al., 2011). La diversità aumenta con l’età Frese et al.2015 telmatucci@gmail.com 12
20/10/2017 L”Impronta” del microbismo inizia già al giorno del parto stesso Frese et al.2015 L”Impronta” del microbismo inizia già al giorno del parto stesso Prevotella Può essere stimolata dalla dieta ricca in polissacaridi da vegetali. Ivarsson et al.2014 telmatucci@gmail.com 13
20/10/2017 Microbiota e tratto intestinale: SuryaSaha, 2014 E l’antibiotico???... telmatucci@gmail.com 14
20/10/2017 Fig 3. Composition of fecal microbiota of conventional and organic pigs in four countries at family level. Gerzova L, Babak V, Sedlar K, Faldynova M, Videnska P, et al. (2015) Characterization of Antibiotic Resistance Gene Abundance and Microbiota Composition in Feces of Organic and Conventional Pigs from Four EU Countries. PLOS ONE 10(7): e0132892. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0132892 Antonia Ricci Cosa succede prima e dopo l’antibiotico telmatucci@gmail.com 15
20/10/2017 The gut Institute, 2014 telmatucci@gmail.com 16
20/10/2017 48.Risks of Antibiotic Exposures Early in Life on the Developing Microbiome.flv PROVE DI CAMPO telmatucci@gmail.com 17
20/10/2017 PROVA PILOTA – PRODOTTO A BASE DI ALGHE ED ALTRO… Caratteristiche: • Funzione energetica, che stimola la rapida assunzione di colostro da parte dei suinetti • Attiva il metabolismo agendo direttamente sul fegato • Induzione immediata dello sviluppo del microbiota con effetti duraturi fino alle fasi di ingrasso • Elevata digeribilità dei componenti telmatucci@gmail.com 18
20/10/2017 OBIETTIVI Gli obiettivi della prova erano quelli di valutare l’effetto della somministrazione del prodotto nelle prime 24 ore di vita sulla mortalità dei suinetti e sugli accrescimenti in sala parto (peso allo svezzamento). MATERIALI E METODI Le scrofe di una banda di parto è stata suddivisa in 2 gruppi (C=controllo; T= trattato). I suinetti figli delle scrofe trattate hanno ricevuto nelle prime 24 ore dalla nascita 2,0cc di prodotto. In entrambi i gruppi le primipare sono state escluse. telmatucci@gmail.com 19
20/10/2017 MATERIALI E METODI La durata della prova fu di 28 giorni, pari all’età media dei suinetti svezzamento. I suinetti sottopeso sono stati identificati singolarmente alla nascita con una marca auricolare. Rilievi: •Peso della figliata ai giorni: 0, 7 e 21 •Peso individuale dei suinetti < 1,0 kg ai giorni 0,7 e 21 •Mortalità % generale •Mortalità % dei sottopeso telmatucci@gmail.com 20
20/10/2017 telmatucci@gmail.com 21
20/10/2017 Primi.mp4 Primoinstante.mp4 telmatucci@gmail.com 22
20/10/2017 RISULTATI PESO PESO N° PESO N° N° SUINETTI MEDIA MEDIO MEDIO A IMG A 7 IMG 7- SUINETTI MEDIO A %MORT. SCROFE SOTTOPESO NATIVIVI ALLA 7 GG GG (gr) 21GG (gr) TOTALI 21GG NASCITA (KG) CONTROLLO 12 121 5 10,5 1,71 2,82 159 6,35 252 6,1 TRATTATO 11 127 13 11,2 1,44 2,64 172 6,29 261 8,8 RISULTATI: Nel gruppo trattato il numero dei suinetti sottopeso (
20/10/2017 PROVA IN LATTAZIONE ALLE SCROFE Materiali e Metodi La prova è stata realizzata in un allevamento della pianura padana, con 800 scrofe a ciclo chiuso, con genetica Topigs (scrofe e verri), in collaborazione con l’Università di Milano (Dipartimento di Scienze veterinarie per la salute, la produzione animale e la sicurezza alimentare, prof. Carlo Corino) . •80 scrofe sono state assegnate alla prova suddivise in due bande di produzione. Ogni banda è stata successivamente suddivisa in un gruppo controllo e un gruppo trattato: omogenei per età e date di parto con la stessa identica alimentazione. telmatucci@gmail.com 24
20/10/2017 Materiali e Metodi •Al gruppo trattato si è somministrato 15 gr di PRODOTTO top dress suddiviso in 2 volte al di dall’entrata in sala parto fino alla fine della prova (21 giorni di lattazione). Materiali e Metodi: •Peso alla nascita della figliata •Peso al pareggiamento (nelle 24 ore) della figliata •Misurazione grasso dorsale a inizio prova e a fine prova •Analisi biochimica del sangue •Peso allo svezzamento della figliata •Mortalità sottoscrofa telmatucci@gmail.com 25
20/10/2017 Risultati Si è osservato un netto aumento del peso dei suinetti svezzati nelle due bande di prova ed un’evidente minor perdita di grasso dorsale delle scrofe durante la lattazione come si può osservare nei seguenti grafici: Risultati Peso Medio allo svezzamento (kg p.v.) 6 5,9 5,9 5,8 5,7 5,7 5,6 5,5 5,4 5,4 5,3 5,3 5,2 5,1 5 Controllo B1 Algatan B1 Controllo B2 Algatan B2 telmatucci@gmail.com 26
20/10/2017 Risultati Perdita di grasso dorsale durante la lattazione (in mm) 6 5,8 5,8 5,6 5,4 5,2 5,1 5 4,8 4,7 4,6 4,4 4,3 4,2 4 Controllo B1 Algatan B1 Controllo B2 Algatan B2 Epidermite essudativa telmatucci@gmail.com 27
20/10/2017 Castrazione Barattolo.mp4 Svezzamento tutte 439.mp4 telmatucci@gmail.com 28
20/10/2017 telmatucci@gmail.com 29
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