Fish-borne parasitic zoonoses in Italy
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20/12/2017
Fish-borne parasitic zoonoses in Italy
Andrea Gustinelli
Unità di Ittiopatologia
Dipartimento Scienze Mediche Veterinarie
Alma Mater Studiorum Università di Bologna
Zoonosi parassitarie di origine ittica:
- a livello mondiale oltre 500 milioni di persone a rischio
- malattie neglette nell’ambito della Sanità Pubblica a causa di
difficoltà diagnostiche, scarsa conoscenza del loro reale/potenziale
peso economico e sanitario e complessità delle attitudini culturali
delle popolazioni coinvolte nei diversi areali geografici
- necessità di chiarire biologia, epidemiologia, diffusione, aspetti
clinici di numerosi agenti di zoonosi di origine ittica al fine di
migliorare le misure di prevenzione e controllo a livello
individuale e collettivo
- aumento del rischio a seguito di crescente
movimentazione di prodotti ittici a livello
internazionale, flussi demografici e cambia-
menti delle abitudini alimentari
2
1
20/12/2017
Problematiche parassitologiche nei prodotti della pesca
Parassiti zoonotici Parassiti non zoonotici
Nematodi Anisakidae del genere Nematodi Anisakidae del genere
Anisakis e Pseudoterranova allo Hysterothylacium allo stadio adulto
stadio larvale e larvale
Trematodi digenei Opisthorchiidae Trematodi digenei allo stadio adulto
allo stadio larvale e larvale
Cestodi Diphyllobothriidae allo Cestodi allo stadio adulto e larvale
stadio larvale
Trematodi digenei Clinostomidae Parassiti formanti cisti:
(casi umani non descritti in Italia) Microsporidia e Myxozoa
allo stadio larvale
Parassiti causanti deformità
scheletriche ed alterazioni del
tessuto muscolare: Myxozoa
Crostacei ectoparassiti
Gli animali acquatici rivestono spesso un ruolo importante nel
ciclo biologico di parassiti a ciclo indiretto (eteroxeni) che allo
stadio adulto o larvale sono in grado di determinare patologia
nell’uomo.
• Difillobotriasi*
Ospite • Heterofidosi e
definitivo Centrocestosi
L’uomo può • Opisthorchiasi*
comportarsi
come:
Ospite • Anisakiasi*
accidentale • Clinostomiasi
* Casi umani segnalati in Italia 4
2
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Difillobotriasi
Opistorchiasi
La difillobotriasi da Diphyllobothrium latum e l’opistorchiasi da Opisthorchis
felineus sono entrambe legate ad ambienti dulciacquicoli, soprattutto lacustri
(Difillobotriasi: laghi prealpini – Opistorchiasi: laghi dell’Italia centrale).
L’anisakiasi si può considerare cosmopolita con alcune distinzioni …
Difillobotriasi
(Shinsen Yamaino Soushi, 1850): "The man ate masu salmon. After a time, a strange
object emerged from the anus and was pulled out: it turned out to be 2–3 m long"
3
20/12/2017
Ospite definitivo (uomo +
altri mammiferi ittiofagi)
Adulto
nell’intestino
Assunzione di larve Uovo
plerocercoidi via
consumo di pesci
crudi parassitati
Ospiti paratenici
Larva
plerocercoide
Pesce persico Secondo ospite intermedio Coracidio
Fattori abiotici predisponenti
Larva (Wicht et al., 2009):
procercoide Ossigeno (↑)
Temperatura (
20/12/2017
TRACCE DELLA SUA ESISTENZA NELLA STORIA …
Prima scoperta archeologica di uova di cestodi del genere
Diphyllobothrium: nel V secolo D.C. in Prussia
Da allora uova di Diphyllobothrium spp. trovate in numerosi siti
archeologici
= i parassiti del genere Diphyllobothrium erano diffusi fin da migliaia di
anni fa sia nel Vecchio sia nel Nuovo Mondo (la più antica datazione
riferisce a 8000 anni A.D. in Perù)
Casi di Difillobotriasi umana in Italia dal 1960 ad oggi
anno N° casi Località Lago Specie ittica
c
r 1 Varese Maggiore Persico + bottatrice Dati raccolti
e 1960-1970 1 Menaggio Como Persico mediante
questionari a
s 1970-1980 1 Bari Anguilla ? ospedali, lab.
c
1980-1990 8 Iseo Persico + lavarello medici, ecc.
e
n 10 - Maggiore -
t 1 Como Como -
e 1990-1995
8 - Iseo - >200 casi da 1997
c a 2002 nei distretti
o 12 Garda -
dei laghi prealpini
n 1996-2000 ? - - (Dupouy-Camet e
s 8 Como Como - Peduzzi, 2004)
u 2001
m 1 Bergamo Iseo -
o 2002 2 Lecco Como -
p 2003 3 Lecco Como Persico + lavarello
e >330 casi da 2002
2 Lecco Como -
s 2004 a 2007 nei distretti
c 1 Cosenza ? Salmone dei laghi prealpini
e 1 Assisi Ginevra - (Wicht B., PhD
d 2005 Thesis)
6 Lecco Como Persico + lavarello
i
l 1 Bergamo Iseo -
a 2006 3 Lecco Como 2011-2017
-
g 8 human cases in Iseo Lake,
2007 3 Lecco Como -
o 1 case in Maggiore Lake, no
c 1 Bergamo Iseo -
2008 cases reported from Como
r 12 Lecco Como -
Lake
u 2009 12 Lecco Como -
d
12 Lecco Como -
o 2010
1 Milano Como -
Totale casi dal 1960 al 2010: 111 – solo dal 2001 al 2010: 69 (62,2 %)
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D. latum adulto Scholz et al., 2009
11
Scholz et al., 2009
6
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Gli ospiti ittici
Larve plerocercoidi di D. latum in muscolo di pesce persico
7
20/12/2017
D. latum
Larva plerocercoide
15
EPIDEMIOLOGIA
Percentuali di positività per larve plerocercoidi di Diphyllobothrium latum in pesci
persico pescati in laghi sub-alpini dell’Italia settentrionale
Lago Maggiore
(versante svizzero)
7,8-14%
Lago d’Iseo
15-25%
Lago di Como Fattori abiotici
27,8-32,5% predisponenti (Wicht
Lago Maggiore et al., 2009):
(versante italiano) Lago di Garda
Ossigeno (↑)
0-5% 0-0,4%
Temperatura
(
20/12/2017
RISULTATI - PREVALENZE
Lago di Iseo 917
Perca fluviatilis 591 9,8%
Esox lucius 10 60%
Lago Maggiore
Lota lota 26 3,8%
Alosa fallax lacustris 128 0
Lago di Lugano Coregonus spp. 56 0
Tinca tinca 29 0
Scardinius erythrophthalmus 36 0
Lago di Varese Altri ciprinidi 0
41
Lago d’Orta
Lago di Como 481
Perca fluviatilis 367 23,4%
Esox lucius 17 88,2%
Lota lota 17 29,4% Lago di Garda
Alosa fallax lacustris 0 - Tutti i pesci esaminati sono risultati
Coregonus spp. -
negativi per la presenza di larve
0
plerocercoidi di D. latum e di
Tinca tinca 23 13,0%*
metacercarie di digenei
Scardinius erythrophthalmus 29 0 Opisthorchiidae
Altri ciprinidi 28 0
CAMPIONAMENTO INVERTEBRATI
I 14547 crostacei copepodi (Iseo=2337, Como=10960, Garda=1250)
sottoposti alla ricerca di larve procercoidi di D. latum sono risultati
TUTTI
NEGATIVI
Sono stati raccolti inoltre 931 gasteropodi nei laghi sub-alpini, le cui analisi non
hanno permesso di individuare stadi larvali di trematodi zoonotici.
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20/12/2017
1020/12/2017
Cambiamento delle abitudini alimentari =
Crescente consumo di prodotti ittici crudi o
affumicati o marinati a freddo
PRINCIPALE FATTORE DI RISCHIO Uomo = malattia
spesso sub-clinica
DIFFICILE
CONTROLLO
Fecalizzazione delle
acque interne per
Pesce persico = mancata depurazione
Secondo ospite
intermedio d’elezione Altri ospiti che
fungono da
serbatoio?
Luccio e Bottatrice = Serbatoi selvatici da
Ospiti paratenici (o investigare
anche intermedi?)
Flussi migratori da
aree endemiche
Altre specie ittiche
(es. coregone) =
Ruolo da investigare
Controllo sanitario dei prodotti ittici =
di difficile applicazione nelle realtà della pesca in
acqua dolce e dell’industria legata agli ambienti
Fattori di rischio e lacustri
punti di intervento Malattia ittica inserita nel Regolamento di Polizia 21
Veterinaria del 1954
Opisthorchiasi da
Opisthorchis felineus
1120/12/2017
Opisthorchiasi/Clonorchiasi
L’Opistorchiasi, assieme alla Clonorchiasi da C. sinensis,
rappresenta la principale zoonosi parassitaria di origine ittica
sostenuta da trematodi digenei (“distomi”) a tropismo epatico
(“liver flukes”).
Si stima che siano circa diciassette milioni le persone infestate
a livello mondiale da tre specie di Opisthorchiidae: O. felineus,
O. viverrini e C. sinensis (7 milioni infestati da quest’ultimo e 9
da O. viverrini).
O. viverrini e C. sinensis sono diffuse principalmente nei paesi
asiatici, mentre O. felineus in varie regioni dell’Europa centro-
orientale, in Turchia ed in tutti i territori della federazione russa
eccetto la parte più settentrionale della Siberia e le regioni più
orientali.
Sembra che le persone attualmente a rischio d’infestazione da
O. felineus possano essere stimate intorno a circa 12 milioni,
con 1,5 milioni di soggetti parassitati nei territori russi.
Trematodi digenei Opisthorchiidae di maggiore interesse sanitario
Opisthorchis felineus (=tenuicollis) O. viverrini Clonorchis sinensis
(species complex)
Distomi epatici
Dimensioni adulto: 7-12 x 2-3 mm Kaewkes (2003) - Acta Tropica 88: 177–186
1220/12/2017
1320/12/2017
Dal 2003 numerosi casi umani di Opisthorchiasi da O. felineus
sono stati invece descritti anche nell’uomo in Italia, tutti correlati
al consumo di tinca marinata preparata da pesci pescati in laghi
dell’Italia centrale.
Casi di Opisthorchiasi umana segnalati in Italia dal 2003 ad oggi (110 pubblicati)
2003 2005 2007 2007 2008 2009 2010 2011
N° casi 2 8 20 2 2 10 46 20
Luogo Perugia Perugia Viterbo Rieti / Viterbo Bomarzo Aosta Viterbo
casi Terni
Prodotto Tinca Tinca Tinca Tinca Tinca Tinca Tinca Tinca
ittico marinata marinata marinata marinata marinata marinata marinata marinata
Lago Lago Lago Lago Lago Lago Lago Lago
Origine Trasimeno Trasimeno Bolsena Bolsena Bolsena Bolsena Bolsena Bolsena
pesca (Bolsena?) (Bolsena?) (indicato
Piediluco)
Luogo Ristorante Ristorante Privato Ristorante Ristorante Privato Cena Ristorante
Consumo pubblica
(Crotti et al, 2004; 2007; Armignacco et al., 2008; 2013; Traverso et al., 2011 ; Pozio et al., 2013 others)
Numerosi focolai e casi isolati non pubblicati fanno salire i casi umani a oltre 200
Negli ultimi anni non si sono verificati nuovi casi umani (Pozio, com. pers.)
1420/12/2017
Outbreak 2010 Outbreak 2011
Opisthorchiasi
SINTOMATOLOGIA NELL’UOMO
Decorso di solito asintomatico (1/3 dei pazienti, vedi Armignacco et
al., 2013)
A volte febbre, dolori addominali, disturbi gastrointestinali, sintomi
simil-epatitici, eosinofilia (vedi Traverso et al., 2012)
Rare le complicazioni quali:
colangite ascendente
colangiocarcinoma
Noduli con flogosi e fibrosi epatica Chamadol et al. 2014
Traverso et al. (2012) Chamadol et al. 2014
1520/12/2017
Percentuali di positività per Opisthorchis felineus in popolazioni
feline in laghi dell’Italia centrale
Lago Trasimeno
23,5-40% gatti
Lago di Bolsena
36,6% gatti
Lago di Bracciano
73,3% gatti
(Crotti et al., 2007; De Liberato et al., 2010)
Gatto randagio trovato morto sull’Isola Maggiore del Lago Trasimeno
Manuali et al., 2010
1620/12/2017
I OSPITE INTERMEDIO
Bithynia spp. (B. leachi species complex)
BASSISSIME PREVALENZE (0,1-1%)
IN AUMENTO NELLE AREE IPERENDEMICHE (6-8%)
ELEVATA RESISTENZA DELLE UOVA
SCARSA RESISTENZA DEL MIRACIDIO
EMISSIONE DELLE CERCARIE FOTO-DIPENDENTE E
IN RELAZIONE ALLA FECALIZZAZIONE DEL BACINO
II OSPITE INTERMEDIO: CIPRINIDI
ELEVATE PREVALENZE NEI SITI ENDEMICI
In Italia:
TINCA (TINCA TINCA)
1720/12/2017
Percentuali di positività per metacercarie di Opisthorchis felineus
in tinche pescate in laghi dell’Italia centrale
Lago Trasimeno
0%
Lago di Bolsena
75-96%
Lago di Vico
100%
Lago di Bracciano
95,4-100%
(De Liberato et al., 2010; Gustinelli et al., 2011)
36
1820/12/2017
37
Prasongwatana et al., 2013
1920/12/2017
Typical dishes made from rawfish in Cambodia. A, Plia trai chauprepared by a family in Takaev province. B, Plohokstored in the home of a
resident for 6 months. C, D, Preparation method of plia trai chau. Minced freshwater fish, herbs such as basil and green tamarind, and
various seasonings such as soy sauce and lime juice are mixed. For plia trai chau , fish less than about 10 cm in length are used
(Miyamoto et al., 2014)
40
2020/12/2017
Metacercariae of Pseudamphistomum truncatum
in tench from lakes in northern Italy
100 µm
Differential diagnosis with other not zoonotic microscopic
Other microscopic metacercariae
metacercariae which could be
found in cyprinids in Italy…
Metacercariae of Petasiger sp. (Echinostomatidae
– not zoonotic) from scales of tench and other
cyprinids from lakes in northern Italy
(…serching for Metagoinimus…)
2120/12/2017
Metacercariae of Holostephanus dubinini
(Cyathocotylidae) in muscle of cyprinids from
northern Italy lakes
METORCHIASI
Kuznetsova VG, Naumov VA, Belov GF (2000). Metorchiasis in the residents of
Novosibirsk area, Russia. Cytobios., 102(399): 33-4.
In 37 residents of Novosibirsk area (Russia) during a serological survey, 48.5% of samples
were positive to Opisthorchis felineus antigens, 37.8% to both O. felineus and Methorchis
bilis antigens, and 13.5% to M. bilis antigens.
Il'inskikh EN, Novitskiĭ VV, Il'inskikh NN, Lepekhin AV (2007). Opisthorchis felineus
(Rivolta, 1884) and Metorchis bilis (Braun, 1890) infections in population of some regions
of the Ob River Basin]. Parazitologiia, 41(1):55-64
Metorchis bilis infection was common in many of the serologically tested people.
Moreover, this helminth was obtained from the biliary ducts of humans in autopsy
2220/12/2017
45
2320/12/2017
Although the conventional control program had been
used in the study population, the incidence of O.
viverrini infection remained the same. Precise and
regular health education and promotion targeting the
main risk factor, Koi pla consumption, improving
diagnosis and treatment, and promoting hygienic
defecation should be used in the prevention and control
program.
Suwannahitatorn et al. 2013 Parasites and Vectors
47
Anisakiasi
2420/12/2017
I nematodi Anisakidae presentano tutti un ciclo biologico complesso (parassiti
eteroxeni), con ospiti definitivi diversi a seconda del genere o della specie.
I nematodi dei generi Anisakis e Pseudoterranova riconoscono quali ospiti
definitivi idonei i mammiferi marini (Anisakis: cetacei e pinnipedi;
Pseudoterranova: pinnipedi), Phocascaris i pinnipedi e Hysterothylacium diverse
specie di pesci marini predatori.
Il genere Contracaecum comprende specie aventi quali ospiti definitivi pinnipedi
o uccelli ittiofagi, anche se ricerche recenti hanno messo in evidenza la
divergenza genetica esistente tra le specie che divengono adulte in uccelli
ittiofagi e quelle che hanno per ospiti definitivi i pinnipedi, suggerendo
l’appartenenza di queste ultime al genere Phocascaris.
Uomo = Ospite Ospite definitivo =
accidentale mammiferi marini
Consumo
di pesci
crudi
parassitati Adulto
da larve
nell’intestino
infettanti
Uovo
Larva III stadio
infettante Pesci predatori - Ospiti paratenici
Uovo
embrionato
Larva III stadio
infettante
Pesci planctofagi - Ospiti paratenici
Larva II o
III stadio
Larva III stadio
infettante
Crostacei Euphasiacea - Ospiti intermedii
Ciclo biologico di Anisakis sp. - trasmissione attraverso la catena trofica
2520/12/2017
Anisakiosi umana in Italia
Il 1° caso ad eziologia certa risale al 1996, la paziente presentava una
violenta epigastralgia associata a vomito e diarrea.
Casi clinici di Anisakiasi umana diagnosticati in Italia dal 1996 al 2011 (Di Rosa, 2011)
51
Forme di Anisakiasi Descrizione Sintomatologia
• Non invasiva la larva non penetra nella mucosa Asintomatica
• Invasiva
– Orofaringea penetra nella mucosa orofaringea Lieve
– Gastro-intestinale penetra nella mucosa gastrica o intestinale Lieve/grave
– Extra-intestinale raggiunge la cavità corporea Grave
• Allergica risposta allergica ad allergeni del parassita Lieve/grave
2620/12/2017
Patologia nell’uomo (forma invasiva)
• Dopo aver provocato edema, iperemia e
talvolta sanguinamento al momento della
penetrazione, inducono una reazione
infiammatoria con infiltrazione di eosinofili
e linfociti, seguita da proliferazione
connettivale con conseguente formazione
di granuloma.
• Invasione della parete dello stomaco più
frequente di quella intestinale;
nell’intestino, l’ileo sembra essere più
spesso coinvolto.
• La maggior parte rimane nella
sottomucosa, ma alcune riescono a
raggiungere la cavità addominale
penetrando nell’intero spessore della
parete.
Patologia nell’uomo (forma allergica)
Risultano segnalati numerosi casi umani dovuti all’azione
allergizzante sostenuta da Anisakis simplex (ipersensibilità di
tipo I, IgE mediata): i sintomi essenziali consistono in
orticaria ed angioedema, raramente shock anafilattico.
Sembra che gli allergeni del parassita siano termostabili,
resistendo quindi sia al congelamento sia alla cottura.
Non è stato ancora stabilito se sia necessaria o meno una
precedente infestazione gastro-intestinale da parte di larve
vitali di A. simplex
Sono ancora da definire i possibili effetti allergizzanti dei
nematodi appartenenti agli altri generi della famiglia Anisakidae
2720/12/2017
Pesci planctofagi e predatori, nonché molluschi cefalopodi rappresentano un
importante anello della catena biologica di questi parassiti, accumulando e
diffondendo le larve ingerite con i pesci ed i crostacei parassitati.
Larve di Anisakis sp. in pesce sciabola Larve di Anisakis sp. in alici
Larve di Hysterothylacium sp. in sardina
Pseudoterranoviasi
spesso asintomatica con eliminazione del verme
con le feci o per “risalita” del tratto esofageo.
In Italia
1 caso umano nel 2002 in cui il paziente riferiva all’anamnesi il
consumo di alcuni soggetti poco cotti di Solea senegalensis
acquistati al mercato ittico di Savona
56
2820/12/2017
Reg. 853/ 2004, Sez. VIII, cap. III
Indagini condotte su alici e sardine commercializzate presso Mercati
Ittici della costa adriatica
2003-2005
• 2636 alici esaminate 700 (26,6%) positive per larve Anisakidae
• 1314 sardine esaminate 544 (41,4%) positive per larve Anisakidae
7,7% alici positive per larve di Anisakis e 98,6% per Hysterothylacium (6,3%
coinfezione)
0,4% sardine positive per larve di Anisakis e 99,6% per Hysterothylacium
2920/12/2017
Indagini condotte su alici e sardine
commercializzate presso Mercati Ittici
della costa adriatica
(Fioravanti et al., 2006)
Indagini condotte nel 2010-2011 nell’ambito di un Progetto di Ricerca Corrente del
Ministero della Salute coordinato da IZS TO (Dr. Prearo) con UNIBO su Anisakis in
alici e sardine del Mar Ligure ed Alto Adriatico x mappatura del rischio
507 alici
0 Anisakis
550 sardine
0 Anisakis
819 alici
0 Anisakis
681 sardine
164 alici 0,3% Anisakis
9,7% Anisakis
200 alici
0,5% Anisakis
200 sardine
450 alici 0 Anisakis
0,9% Anisakis
520 sardine 715 alici
0,2% Anisakis 6,4% Anisakis
441 alici 212 sardine
4,3% Anisakis 0 Anisakis
3020/12/2017
Pascual et al., 2007
Alimentazione
Upwelling
Ambiente
Cetacei
Popolazioni
Migrazioni
Betulla Morello e Arneri, 2009
Larve di III stadio di Anisakis sp.
Dente Poro
perforatore escretore
Anello
nervoso
Esofago
Ventricolo
Intestino
Anisakis tipo I Anisakis tipo II
3120/12/2017
Dente Dente
perforatore Dente
Poro perforatore perforatore
escretore Poro
escretore
Anello Anello
nervoso Anello
nervoso
nervoso Poro
escretore
Esofago
Esofago Esofago
Cieco Cieco
intestinale intestinale
Ventricolo Ventricolo Ventricolo
Cieco
intestinale
Appendice Appendice
ventricolare ventricolare
Intestino Intestino
Intestino
Pseudoterranova sp. Contracaecum sp. Hysterothylacium sp.
(Wootten e Bron, 2008)
(Levsen e Lunestad, 2010)
3220/12/2017
Interventi di profilassi e controllo…
Nota del Ministero della Salute del febbraio 2008:
• Informazione adeguata del personale veterinario del
SSN, degli addetti al settore e di categorie
potenzialmente a rischio
• Commercializzazione controllata indicando ”da
consumarsi previa cottura o congelamento a -20°C
per una settimana”
• monitoraggio epidemiologico sul pescato nazionale
con particolare riguardo ai ciprinidi
3320/12/2017
“Advanced tools and research strategies for parasite
control in European farmed fish”
Il progetto europeo Horizon 2020 ParaFishControl di durata quinquennale
(01.04.2015-01.04.2020) e coordinato dal CSIC (Spagna), si prefigge quale
obiettivo primario quello di incrementare la sostenibilità e la competitività
dell’acquacoltura europea mediante l’ampliamento delle conoscenze sulle
interazioni tra agenti parassitari ed ospiti ittici e mediante lo sviluppo di soluzioni e
strumenti innovativi per la prevenzione ed il controllo delle principali malattie
parassitarie che colpiscono i pesci allevati in Europa.
ParaFishControl is a European Union funded project under the Horizon 2020 programme. The
overarching goal of ParaFishControl is to increase the sustainability and competitiveness of the
European aquaculture industry. The 29 partner strong consortium will achieve this by improving our
understanding of fish parasite interactions and by developing innovative solutions and tools for the
prevention, control and mitigation of the most harmful parasitic species affecting the main European
farmed fish species
This project has received funding from the European Union’s Horizon 2020 research and innovation programme under grant
agreement No 634429. This output reflects the views only of the author(s), and the European Union cannot be held
responsible for any use which may be made of the information contained therein.
PFC – 1st AM – Copenhagen, 13-15 September 2016
3420/12/2017
Work Package 7 Fish product safety - UNIBO
761 ESB AND GSB SAMPLED FROM 4 FARMS:
FARM 1 – FLOATING CAGES LOCATED IN
NORTHERN THYRRENIAN SEA
FARM 2 - INLAND FARM LOCATED IN
CENTRAL THYRRENIAN SEA (FED WITH A
LARGE AMOUNT OF SEA WATER WITHOUT
FILTRATION SYSTEM AND A HIGH RISK OF
INTRODUCTION OF DIRECTLY AND
INDIRECTLY TRANSMITTED PATHOGENS)
FARM 3 – FLOATING CAGES LOCATED IN
CENTRAL/SOUTHERNTHYRRENIAN SEA
FARM 4 – FLOATING CAGES LOCATED IN
SOUTHERN ADRIATIC SEA
PFC – 1st AM – Copenhagen, 13-15 September 2016
PFC – 1st AM – Copenhagen, 13-15 September 2016
3520/12/2017
71
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