ESPERIENZE INTERNAZIONALI DI SUPPORTO PER LA DIAGNOSI DELLA RABBIA IN AFRICA MORGANE GOURLAOUEN, PHD - MINISTERO DELLA SALUTE
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Esperienze internazionali di supporto
per la diagnosi della rabbia in Africa
Morgane Gourlaouen, PhD
IZSVe, Centro di referenza nazionale e Centro di referenza FAO per la rabbia
Ministero della Salute
Roma, il 30 Septembre 2019
Sommario
• La rabbia e sintomi
• Il ruolo del laboratorio
• RESOLAB
• Trainings in Laboratori Veterinari Centrale in Africa
• Proficiency testing
• Conclusi
2
La Rabbia
• Almeno 60 000 decessi/anno
• In Africa circa 20 000-25 000 decessi/anno
• Numeri sottovalutati (malattia negletta)
• Malattia prevenibile (PEP)
• Tutti mammiferi sono suscettibili
• Il cane è responsabile del 99% dei casi di
trasmissione del virus
WHO-rabies-bulletin.org
3
La rabbia e il cane
• Rabbia furiosa o muta
• Cambio di comportamento
• Agressività
• Convulsioni
• Ipersalivazione
• Paralisi
• Automutilazione
• Diagnosi differenziale (Cimurro, epatite infettiva....)
• Necessità di conferma del laboratorio
4
Il ruolo fondamentale del laboratorio nell’ eradicazione della rabbia
Reservoir
Stakeholder Endemicità
LABORATORIO
PEP Diagnostica
Epidemiologia
5
Il ruolo fondamentale del laboratorio nell’ eradicazione della rabbia
• Migliorare le capacita dei laboratori
• Consentire accesso alla vaccinazione
• Rinforziare il senso di responsabilità nei proprietari di cani
• Sensibilisare attraverso educazione e la conoscienza della malattia
6
RESOLAB
• Network di 23 laboratori diagnostici veterinari in Africa occidentale e centrale
• Nel 2007 iniziativa della FAO per AI e malattie diffusive
• Nel 2010 - il « sub-network » rabbia
• Attività di eventi formativi
• Raccolta dei report attivita laboratorio
• Support tecnico
7
RESOLAB - Informazioni
https://rabiesalliance.org/networks/paracon/bulletin 8
La diagnostica - pilastro per l'eliminazione della rabbia
• 3 metodiche di riferimento (Gold standard) A
• Manuale dell’OIE N
T
• Immunofluorescenza (DFA) I
• Direct immuno-histochemical test (dRIT) G
E
• Metodiche molecolari N
I
V
I
R
A
L
I
ARN VIRALE
9
Attività di formazione sulla rabbia
• Biosicurezza
• Necroscopia
• Campionamento
• Analisi di laboratorio
• Analisi dei risultati
• Linee guida internazionali (OIE)
• Tracciabilità
• Epidemiologia
10Congo – Una Storia di Successo
• Formazione a Brazzaville nel 2012
• Epidemia nell’area di Pointe Noire nel 2013
• Conferma da parte del laboratorio
• Pronta risposta delle autorità competenti
• Campagna di vaccinazione
11Liberia – LVC Leon Q. Ledlum (2018)
• Dopo anni di inattività diagnostica
F
• Ristrutturazione laboratorio
A
• Assunzione nuovo personale O
• Formazione in diagnostica specialistica
• Spedizione campioni a IZSVe per conferma
• Pubblicazione sequenze online (GenBank)
• Partecipazione al Ring test
IZSVe
12Guinea – LVC Conakry (2018)
• Dopo anni di inattività diagnostica
• Ristrutturazione laboratorio F
A
• Assunzione nuovo personale O
• Formazione in diagnostica specialistica
• Spedizione campioni a IZSVe per conferma
• Pubblicazione sequenze online (GenBank)
• Partecipazione al Ring test
IZSVe
13Attività di formazione del l’IZSVe sulla rabbia in Africa
• Periodo 2009-2018
• 263 partecipanti (89 ospitati nel Centro di
Referenza italiano, 174 in altri paesi)
• 215 partecipanti provenienti da paesi
africani
• 46 paesi coinvolti (30 africani, 4
mediorientali, 12 asiatici)
• Più di 20 trainings
14Proficiency test – Circuito Inter-laboratorio
Valutazione performance diagnostiche
Delle metodiche classiche
Campioni incogniti
Valutazione performance tecnici di laboratorio - Richiesto da ISO 17025
15
(sistema qualità dei laboratori diagnostici)Laboratory
Organizzazione Generale Name
Laboratoire National d’Elevage (LNE)
Country
Burkina Faso
Laboratoire National Vétérinaire (LANAVET) Cameroon
Laboratoire National Vétérinaire (LANAVET
Cameroon
Yaoundé)
Laboratoire Central Vétérinaire de Bingerville Cote d'Ivoire
National Animal Health Diagnostic and
Ethiopia
Investigation Center (NAHDIC)
Laboratoire Vétérinaire de Kinshasa D. R. Congo
Accra Veterinary Laboratory Ghana
Laboratoire Central Vétérinaire de Conakry
Guinea
Direction nationale de l’Elevage
Central Veterinary Laboratories
Kenya
Molecular Laboratory
Leon Quist Ledlum Central Veterinary diagnostic
Liberia
Laboratory (CVDL)
Laboratoire Central Vétérinaire du Mali Mali
Laboratoire National d’Elevage et de Recherches
Senegal
Vétérinaires (LNERV)
Central Veterinary Laboratory Teko Sierra Leone
Tanzania Veterinary Laboratories Agency (TVLA) Tanzania
National Animal Disease Diagnostic and
Uganda
Epidemiology Centre (NADDEC)Organizzazione Generale 1. Lettera di invito Documenti correlati (protocolli, Linee guida, Lista dei reagenti) 2. Certificato di Vaccinazione 3. “Proficiency test – Perché? Come? Tutto quello che bisogna sapere per fare un PT di successo”. Un webinar co-organizzato con FAO
Organizzazione Generale • 10 Campioni + controlli • Immunofluorescenza (DFA) • PCR • Protocollo e reagenti per la PCR rabbia forniti da RC e FAO (Strumentazione già presente in laboratorio)
Diagnosi molecolare della rabbia
• Gold standard OIE 2018
• Campioni degradati
Tempistiche di trasferimento
Analisi forensi
• DNA finale stabile
• Sequencing dei ceppi
• Problema con il DFA
19Risultati
PT AFRICA PT EUROPE
Sensibilità Specificità Concordanza Concordanza
DFA 89.2% 86.2% 87.7% 87.1%
PCR 96.7% 100% 98.2% 90.5%
• Performance dei laboratori Africani di ottimo livello
• Criteri di accettabilità - 79% laboratori
• Efficace applicazione della nuova metodica molecolare (PCR)
20Altri numeri importanti
• 29% senza vaccinazione adeguata
• Protocollo PCR introdotto in 9 laboratori
Maggio 2017 Settembre 2017 Dicembre 2017 Gennaio 2018
Preparazione campioni Invito Spedizione Risultati 11/15
Dicembre 2018 Ottobre 2018
Risultati 14/15 Partecipazione Liberia e Guinea
20 mesi in totale
21Conclusioni e nostri progetti futuri
• Risultati ottimali del primo PT • Proficiency test 2020
• Attività diagnostica in Liberia and • Training locale in Sierra Leone
Guinea
• Training regionale in Cameroon
• Caratterizzazione dei ceppi
circulanti in Liberia and Guinea
22Acknowledgments
IZSVe Tutti nostri collaboratori in Africa
Paola De Benedictis
Terregino Calogero FAO collegui
Francesca Ellero Angélique Angot
Stefania Leopardi Cristian De Battisti
Marzia Mancin Béatrice Mouillée
Barbara Tramontan Adama Sow
Barbara Zecchin Lidewij Wiersma
USAID for fundingGrazie mille per la vostra attenzione
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